蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一，承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础。目前常用的蛋白测量的方法主要有BCA法、考马斯亮蓝法(Bradford)和Lowry法等。
BCA法
原理
在碱性环境下蛋白质与Cu2 络合并将Cu2 还原成Cu1 (biuret reaction)。BCA与Cu1 结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。
实验步骤
1.按试剂盒说明书配置BCA工作液；2.完全溶解蛋白质标准品，加到96孔板的蛋白标准品孔中，按照说明书要求对标品进行梯度稀释，加入BCA工作液，用酶标仪测定其吸光度；3.以样品浓度为X轴，吸光度为Y轴，绘制标准曲线；4.待测样品中加入BCA工作液，测定吸光度，带入标准曲线中，计算样品浓度。与Lowery法相比，BCA蛋白测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质影响小。与Bradford法相比，BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。
考马斯亮蓝法(Bradford)法
原理
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
实验步骤
1.按试剂盒说明书配置Bradford染液；2.完全溶解蛋白质标准品，加到96孔板的蛋白标准品孔中，按照说明书要求对标品进行梯度稀释，加入染液和染料结合液后，用酶标仪测定其吸光度；3.以标品浓度为X轴，吸光度为Y轴，绘制标准曲线；4.各孔中加入染液和染料结合液，测定样品吸光度，带入标准曲线中，计算样品浓度。Bradford法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，最小可测2.5μg/mL蛋白质。
斐林—酚试剂(Lowry)法
原理
斐林(Folin)-酚试剂法结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应，其中包括两步反应：第一步是在碱性条件下，与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸、磷钨酸试剂还原，生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物，颜色深浅与蛋白含量成正相关，在650nm波长下有最大光吸收。
实验步骤
与上述两种方法大致相同
LORRY法灵敏度高,重复性好，适于5～l00μg蛋白质的定量，耗时长，操作要严格计时，在实验中要特别注意排除还原物质、柠檬酸等的干扰作用才能得到最准确的实验结果。
这几种方法共同点在于，都需要绘制标准曲线，而标准曲线及待测样品往往数量较多，为了缩短实验耗时，保证测量准确性，可使用酶标仪对吸光度进行测定。
AMR-100酶标仪
AMR-100酶标仪是一款基于滤光片的高品质光吸收酶标仪，波长范围340nm~750nm，适合科研和临床的应用。适用96孔板，可满足不同通量的要求。7英寸触屏液晶显示，易于使用，不需操作键盘，数据和程序可保存在仪器内，或者通过U盘导出。读板速度快，能实现快速测量，提供准确性高，重现性好的测量结果。是实验室酶标仪的理想选择。
性能指标
|
显示 |
7英寸彩色触摸屏，分辨率为800*480像素 |
|
光源 |
卤钨灯，寿命可达2000h |
|
波长范围 |
340-750nm，覆盖整个可见光波长 |
|
滤光片 |
8片滤光片轮，标配4块滤光片：405,450,492,630nm，另可选配340nm-750nm波长滤光片 |
|
滤光片带宽 |
±3nm |
|
读数范围 |
0-4.000Abs |
|
线性范围 |
0-2.000A时≤±1% ;2.000-4.000A时≤±2% |
|
分辨率 |
0.001Abs |
|
准确性（405nm) |
±1%(0-3Abs)±2%(3-4Abs) |
|
精确性（405nm) |
CV≤0.2%(0-3Abs)CV≤1.0%(3-4Abs)标准测量模式 |
|
测量速度 |
<6S 96孔板整板检测 |
|
用户界面 |
内置软件 |
|
操作显示 |
触屏输入，液晶显示全板信息，可外接键盘鼠标 |
|
内存 |
可存储200个测量程序和10万个测量结果(96孔板) |
|
接口 |
3个USB接口，分别用于连接电脑，打印机和U盘 |
|
电源 |
AC100-240V，50-60Hz |
