紫外可见分光光度计外光路属于该设备的主要组成系统，在该系统中分别有光源、反射镜或者透镜组成，这种设备中所用到的光源往往是有氘灯、钨灯和灯架组成的，光路中的反射镜多用凹面反射镜，市场中一些紫外可见分光光度计也会采用透镜或者柱面镜，其主要作用就是能够把光源发出的光成像在相关单色器的入射狭缝上，简单说就是能把光源发出的光直接集中在单色器的入射狭缝上。
紫外可见分光光度计的工作原理：
分光光度法分析的原理是利用物质对不同波长光的吸收现象来进行物质的定性和定量分析，通过对吸收光谱的分析，判断物质的结构及化学组成。
本仪器是根据相对测量原理工作的，即选定某一溶剂（蒸馏水、空气或试样）作为参比溶液，并设定它的透射比（即透过率T）为100%，而被测试样的透射比是相对于该参比溶液而得到的。透射比（透过率T）的变化和被测物质的浓度有一定函数关系，在一定的范围内，它符合朗伯——比耳定律。
T=I/Io
A=KCL=‐㏒I/Io
其中T 透射比（ 透过率）
A 吸光度
C 溶液浓度
K 溶液的吸光系数
L 液层在光路中的长度
I 光透过被测试样后照射到光电转换器上的强度
Io 光透过参比测试后照射到光电转换器上的强度
紫外可见分光光度计就是根据这一原理，结合现代精密光学和最新微电子等高新技术，研制开发的具有先进水平的新一代高级分光光度计。
在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂，因为这是非常重要的。通常情况下，干燥剂有效时，仪器的工作是不会出现任何问题的。可是当干燥剂失效之后，所出现的问题是非常严重的。除了仪器上面显数不准之外，很容易使反射镜变得污秽，从而使得光线率不准确。因此，日常使用仪器时，一定要注意干燥是否有效。当发现失效后，要及时进行更换。
由于紫外可见分光光度计的光源室需要散热，灰尘容易通过散热孔进入仪器内部，如果仪器内部灰尘太多可用吹风机和酒精进行清理，特别注意清理反光镜时需用火棉胶粘除，因为反光镜表面为一层很软的镀膜很容易被擦花。光学元件位置发生变化也是杂散光超差的主要原因。
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