同行们都知道,全自动生化分析仪是由于其测量速度快、准确性高、消耗试剂量小,现已在各级医院、防疫 站、计划生育服务站得到广泛使用。配合使用可大大提高常规生化检验 的效率及收益。因此我们也有必要了解一下以下几个方面。

全自动生化分析仪的工作原理(全自动生化分析仪有哪些模块组成)(1)

1,全自动生化分析仪有那些模块组成 ?

光学系统:老式的ACA系统采用卤钨灯、透镜、滤色片、光电池组件。新式ACA系统光学部分有很大的改进,ACA的分光系统因其光位置不同有前分光和后分光之分,先进的光学组件在光源与比色杯之间使用了一组透镜,将原始光源灯投射出的光通过比色杯将光束变成光速(这与传统的契型光束不同),这样,即使比色杯再小,点光束也能通过。与传统方法相比,能节约试剂消耗40-60%。点光束通过比色杯后,在经这一组还原透镜(广差纠正系统),将点光束还原成原始光束,在经光栅分成固定的若干种波长(约10种以上波长)。采用光/数码信号直接转换技术即将光路中的光信号直接变成数码信号。将电磁波对信号的干扰及信号传递过程中的衰减完全消除。同时,在信号传输过程中采用光导纤维,使信号达到无衰减,测试精度提高近100倍。光路系统的封闭组合,又使得光路无需任何保养,且分光准确、寿命长。

恒温系统:由于生物化学反应时温度对反应结果影响很大,故恒温系统的灵敏度、准确度直接影响测量结果。早期的生化仪器采用空气浴的方法,后来发展到集干式空气浴与水浴优点于一身的恒温液循环间接加温干式浴。其原理是在比色杯周围设计一恒温槽,在槽内加入一种无味、无污染、不蒸发、不变质的稳定恒温液,恒温液的容量大,热稳定性好、均匀。在比色杯不直接接触恒温液,克服了水浴式恒温易受污染和空气浴不均匀、不稳定的特点。

样品反应搅拌技术和探针技术:传统的反应搅拌技术采用磁珠式和涡旋搅拌式两种。现在流行的搅拌技术是模仿手工清洗过程的多组搅拌棒组成的搅拌单元,当第一组搅拌棒在搅拌样品/试剂或混合溶液时,第二组搅拌棒同时进行高速高效的清洗,第三组搅拌棒也同时进行温水清洗和风干过程。在单个搅拌棒的设计上,采用新型螺旋型高速旋转搅拌,旋转方向与螺旋方向相反,从而增加了搅拌的力度,被搅拌液不起泡,减少微泡对光的散射。试剂及样品探针依照早期电容式传感的原理,但略加改进,增加了血凝块和蛋白质凝块的报警,依照报警级别的重测结果,减少吸样误差,提高测试结果的可靠性。大型生化仪器每小时检测数多在1000个以上,因此自动重测相当重要,测试结果的主观评价和手工重测已不能满足临床的需要。

其他方面:试剂、样品的条形码识别和计算机登录,早期生化仪器由于缺乏条码识别功能,出现错误机会较多。近几年无论进口、国产生化仪器均采用条码检测,这项技术在生化仪器上的使用给高速ACA的研制提供了技术支持,也使得仪器相当支持。软件的开发简单易行,因此,条码检测是仪器智能化的基础。开放式试剂,作为医院选择机型的一项重要因素,仪器是否支持开放式试剂非常重要。试剂开放后,医院、科研单位可自主选择试剂供应商,在衡量价格、低度器结果的可靠性、试剂有效期等方面有了较大的自由度。离子选择电极分析附件(ISE)、人体血清和尿液电解质指标相当重要,ACA系统附带ISE后,医院可节省费用。

2,全自动生化分析仪原理有那些?

自动化分析仪就是将原始手工操作过程中的取样、混匀、温浴(37℃)检测、结果计算、判断、显示和打印结果及清洗等步骤全部或者部分自动运行。如今,生化检验基本上都实现了自动化分析,还有专为大型或超大型临床实验室和商业实验室设计的全自动生化分析系统,可根据实验室的检测量任意配置。

无论是当今运行速度最快(9600Test/h)的模块式全自生化分析仪,还是原始手工操作用于比色的光电比色计,其原理都是运用了光谱技术中吸收光谱法。是生化仪最基本核心。

双波长检测原理的作用:

1、消除噪音干扰。

2、减少杂散光影响。

3、减少样品本身光吸收的干扰:当样品中存在非化学反应的干扰物如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等时,会产生非特异性的光吸收,双波长方式可以部分消除这类光吸收干扰。

3,其他方面问题

为什么干扰物主波长和次波长越临近越好?

双波长设置的情况是,干扰物的光一般会出现光散射和非特异性光吸收,就需要设置主波长和副波长,主波长就是待测物质特征吸收峰处。副波长设置的原则是干扰物在主波长的吸收与副波长吸光率越接近越好,如己糖激酶法测血糖,340nm作为主波长,380nm为副波长,血清蛋白在340nm和380nm处具有几乎同等的吸收峰,因此能消除血红蛋白的干扰。所以干扰物主波长和次波长越临近越好。

测定要求

1.样品:血清、尿液、脑脊液等。

2.试剂:单试剂、双试剂

3.双波长:由主波长和副波长构成的两个波长。可以消除在检测过程中的干扰。

4.校准品(标准):比对未知样品的浓度

5.质控品:用于生化仪在日常工作中对仪器、试剂等方面状态的监控。

方法

1.终点法(endessay)完全被转化成产物,不再进行反应达到终点,取反应终点的吸光度来计算被测物质的浓度。生化检验中除酶和BUN、CRE外几乎都用终点法来进行检测。

1).一点终点法:取反应达终点时的一个点的吸光度来计算结果。

2).二点终点法:取反应尚未开始时读取一个点的吸光度,待反应达终点时再取第二点的吸光度。用第二点吸光度减去第一点吸光度的差值来计算结果。主要用于扣除试剂和样品空白。保证结果的准确性。一般双试剂用。

2.固定时间法(两点法):是取尚在反应中的两点间的差值来计算结果。此两点既不是反应起始点也不是终点。主要用于检测一些非特异性的项目,如肌酐。

3.连续监测法(动力学法、速率法):是在测定酶的活性或酶代谢产物时,连续取反应曲线中呈线性变化吸光度值(△;A/min)来计算结果。因在反应线性时间内各点间的吸光度差值为零故又称谓零级反应。

试剂问题

混成单一:比如酶法肌酐试剂,第一步R1中的酶要消除样品中内源性肌酸的干扰,如果混成单一试剂,则会使检测结果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成单一试剂,因为它们都要分别清除HDL和LDL以外的脂蛋白,从而达到检测的目的,如果混成单一试剂,则会使测定的HDL和LDL不准确。另外,有的试剂混成单一试剂后,稳定性和抗干扰能力也会明显下降。解决办法:①在仪器通道或试剂位允许的情况下尽量使用双试剂;②如一定要使用单一试剂,最好选择试剂厂家针对部份项目专门生产好的单一试剂。

开瓶:随着全自动生化分析仪的普及,“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视,但是就目前有的试剂方法学来讲,还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标,比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂,开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳,使试剂本身的PH值下降,如果长时间开瓶不定标或校准,会使检测结果发生偏离,在国外有的项目有明文规定,必须72小时之内定标,比如BUN。但是在国内的某些实验室为了方便,很长时间都不作校准,导致测定结果的不准确。解决办法:了解试剂的特性,及时对部份项目进行校准,对于每天标本量不多的医院,可按1~2天的用量取用试剂放入仪器。

相混:将不同批号的试剂混合在一起使用的现象在检验中经常发生,当然这一方面是为了节省成本,另一方面为了方便。但是不管是什么品牌、什么试剂,由于不同批号的试剂生产时间不同,试剂中工具酶的活性会有差异,会发生水解的底物浓度随时间长短也会不同。因此混在一起使用而又不定标,可能会导致检测结果的不准确。还有如果有的试剂开瓶时间太长,空气中的灰尘或细菌会进入瓶中,由于有的试剂含有大量的蛋白质和盐,是细菌生长的最好条件,虽然有的试剂添加了防腐剂,但防腐剂的防腐也是有一定限度的,而且绝大多数厂家的试剂中是没有加防霉剂的。解决办法:① 不同批号试剂建议不要混用,如果混用最好重新定标;②试剂瓶在仪器内使用时间不要过长,及时更换。③一般每个试剂瓶内由于试剂针不能吸完,或多或少都会留有几毫升的试剂,如果是同一批号可以将未开瓶的同一批号试剂往里倒。但如果不是同一批号的试剂时倒人后最好定标,最好的做法是将每个批号的剩余试剂留起来待一定数量后混在一起,然后重新定标后检测。

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