摘要:

海南巨噬原代细胞分离培养(破骨细胞TRPV5通道对体外降解生物珊瑚人工骨的影响)(1)

文题释义:

TRPV5:是瞬时性受体电位通道超家族中的成员,由4个天冬氨酸残基环组成了选择性过滤序列,此序列构成主细胞外的Ca2 结合袋,参与细胞内外Ca2 的调节。目前研究已证明TRPV5高度表达于人与小鼠破骨细胞刷状边缘上,对骨代谢过程中Ca2 的吸收与骨组织重塑有着重要功能。

生物珊瑚人工骨:是天然珊瑚骨经过“热液置换”后的产物,其分子式为Ca5(PO4)3OH,化学成分99%为碳酸钙,Ca∶P=10∶6;其不仅具有与人类松质骨类似的孔道结构,还具有骨传导性﹑良好的生物相容性,基本满足人工骨的需求,但是由于其植入人体内,在“爬行替代”代谢过程中的降解速率较慢,在临床上的应用受到了一定限制。

背景:生物珊瑚人工骨是一种修复长段骨缺损的良好替代材料,但其在体内的降解吸收速率与新生骨的生长速率不够匹配,因而其在临床上的应用受到限制。

目的:探讨破骨细胞TRPV5通道对生物珊瑚人工骨降解的影响。

方法:取生长状态良好的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,接种于生物珊瑚人工骨片上,加入破骨细胞诱导分化培养液,观察有破骨细胞出现后,分别加入含0,50,500,5 000 µmol/L钌红(TRPV5通道抑制剂)的破骨细胞诱导分化培养液。培养一定时间后,激光共聚焦显微镜下观察TRPV5通道蛋白表达,扫描电镜下观察生物珊瑚人工骨片上的吸收陷窝,应用Western Blot检测细胞TRPV5通道蛋白表达。

结果与结论:①激光共聚焦显微镜:TRPV5表达于破骨细胞的胞浆和胞膜,随着钌红浓度的增加,破骨细胞上TRPV5表达减少;②扫描电镜:0 nmol/L钌红组骨片上可见大片连续的骨吸收陷窝,其他浓度钌红组骨片上的骨吸收陷窝减少,并散在分布,并且随着钌红浓度的升高,骨陷窝面积逐渐减少;③Western Blot检测:与0 nmol/L钌红组比较,其他浓度钌红组TRPV5通道蛋白表达明显降低(P < 0.05或P < 0.01);④结果表明:破骨细胞在生物珊瑚人工骨片上生长良好,TRPV5可作为调控生物珊瑚人工骨降解速率的靶点。

https://orcid.org/0000-0002-8293-3378(崔红旺)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料;口腔生物材料;纳米材料;缓释材料;材料相容性;组织工程

关键词: 生物珊瑚人工骨, 降解, 破骨细胞, TRPV5通道, 骨缺损

引用本文:崔红旺, 王良盛, 温 鹏, 孟志斌. 破骨细胞TRPV5通道对体外降解生物珊瑚人工骨的影响[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(21): 3337-3342.

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破骨细胞TRPV5通道对体外降解生物珊瑚人工骨的影响

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