培养基的配制是微生物实验人员的基本技能之一。适宜的培养基制备方法、选择正确的灭菌方式、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证,那么以下经验总结不容错过。

培养基配制注意哪些(培养基配制常见质量问题分析及注意事项)(1)

01 常见的质量问题原因分析

问题1 培养基不能凝固

原因分析

制备过程中过度加热

低pH造成培养基酸解

称量不正确琼脂未完全溶解

培养基成分未充分混匀

问题2 pH不正确

原因分析

制备过程中过度加热

水质不佳

外部化学物质污染

测定是温度不正确

pH计为正确校准

脱水培养基质量差

问题3 颜色异常

原因分析

制备过程过度加热

水质不佳

pH不正确

外来污染

脱水培养基质量差

问题4 产生沉淀

原因分析

制备过程过度加热

水质不佳

pH不正确

原料中的杂质

脱水培养基质量差

问题5 培养基出现抑制/低生长率

原因分析

制备过程过度加热

水质不佳

脱水培养基质量差

使用成分不正确,添加剂用量不正确

容器或水中的有毒残留物

问题6 选择性差

原因分析

制备过程过度加热

脱水培养基质量差

配方使用不对

添加成分不正确,例如添加成分是培养基过热、添加浓度错误等

问题7 污染

原因分析

无菌操作存在问题

添加剂污染

不适当灭菌

02 注意事项

1、分装好的培养基应当天进行灭菌处理(2小时内灭菌最佳),分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。

2、实验室采用湿热灭菌对培养基进行灭菌处理,按照培养基使用说明采用合适的灭菌温度和时间。尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。

3、每次制备培养基均应有配制记录,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。

4、培养基应存放于冷暗处,最好放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。

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培养基配制注意哪些(培养基配制常见质量问题分析及注意事项)(2)

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