干眼症(DED)是最常见的眼部疾病之一，患病率从8.7%到30.1%不等。DED初始管理通常包括人工泪液置换，对于严重的DED患者的治疗包括血液来源的滴眼液[Dry Eye Workshop II (DEWS II)推荐],如自体血清(AS)和富血小板血浆(PRP)。虽然人工泪液和血源性眼药水都能为干眼症提供润滑，但血源性眼药水还可改善眼表并促进伤口愈合，是由于血源性眼药水AS和PRP中含有上皮营养因子，主要包括表皮生长因子(EGF)、纤连蛋白、血小板衍生生长因子(PDGF-AB)和转化生长因子(TGF-β1)。
本研究旨在比较AS和PRP中上述营养因子在不同储存条件下(基线时、4℃1周、-20℃1月和3月)的浓度差异，且进行一项前瞻性双盲随机对照试验比较PRP和AS在DED治疗中的临床疗效。
作者共招募10名DED患者，所有患者均符合以下标准：干眼症状(眼表疾病指数（OSDI≥13）)，荧光泪液破裂时间(FTBUT)<10s，异常眼表染色(>5个角膜斑点或>9个结膜斑点）。排除标准：年龄18岁以下，入组前2周内使用过PRP或AS，使用免疫抑制药物，血液传播疾病，妊娠，糖尿病、慢性肾病、肝硬化或全身感染等基础疾病，双眼之间干眼症的严重程度不等。
PRP和AS制备：PRP制备，将受试者35ml外周血收集到50ml管中，用3.8%柠檬酸钠抗凝，22±2℃下2200g离心10min,收集血浆制备成PRP；AS制备，将受试者35ml外周血收集到50ml管中，31℃下孵育2h使其凝结，以4℃下3000g离心30min，收集上清血清制备成AS。用平衡盐溶液(BSS)将收集的AS和PRP从100%稀释到20%，保留每个样品等分试样用于检测，将其余样品等分到5ml瓶供患者使用。
上皮营养因子的测定：通过ELISA方法对PRP和AS样品中EGF、TGF-β1、纤连蛋白和PDGF-AB进行测定。立即测定新鲜样品的基线(t0)上皮营养因子浓度，样品等分在4°C或-20°C下储存，4°C1周(t1)，-20°C1月(t2)和-20°C3月(t3)。
临床评估：每个受试者每小时随机分配PRP到一只眼睛和AS到另一只眼睛，持续1个月。受试者没有被告知哪只眼睛接受了PRP或AS，用瓶子颜色和说明标签区分内容物。用OSDI和干眼问卷评估干眼症状，用牛津染色评分、荧光泪液破裂时间、Schirmer试验、结膜和角膜染色评估干眼症迹象，由同一评估员在基线和1个月测量最佳矫正视力(BCVA)和眼压(IOP)进行安全性评估、不良事件询问及患者对PRP或AS的偏好。
共纳入10名患者的20只眼，所有患者均为女性，年龄为65.6±14.35岁。基线BCVA、干眼问卷评分、OSDI、FTBUT、牛津染色评分和Schirmer测试在双眼之间没有统计学差异。
AS和PRP中上皮营养因子浓度的比较：两种储存温度的两个或多个时间点，PRP中EGF、纤连蛋白和TGF-β1的浓度均高于AS，纤连蛋白和TGF-β1浓度的差异有统计学意义，AS中PDGF-AB的浓度显著高于PRP在基线水平和储存在−20°C后（t2和t3)。
不同条件下保存后PRP和AS中上皮营养因子的浓度：4°C下储存1周后，PRP中EGF、纤连蛋白和PDGF-AB的浓度较基线显著增加；-20°C下储存后，仅PRP中EGF和PDGF-AB的浓度在至少一个时间点显著高于基线水平（1个月和3个月），纤连蛋白和TGF-β1的浓度在两个时间点与基线时的浓度没有变化。
AS中EGF、PDGF-AB和TGF-β1的浓度在4°C保存时与基线相比无差异，纤连蛋白的浓度显著增加；-20°C下储存后，AS中EGF和TGF-β1为1个月和PDGF-AB为3个月显著增加，纤连蛋白的浓度与基线时无差异。
PRP和AS在DED中的疗效比较：10名患者每只眼睛平均每天滴10次，使用PRP或AS后未报告不良事件，未报告PRP和AS之间的偏好。使用PRP滴眼液1个月显著改善改良干眼问卷和OSDI评分，使用AS眼药水1个月改善改良干眼问卷和OSDI评分，但仅有OSDI评分的提高有统计学意义。使用PRP和AS后，FTBUT、Schirmer测试和牛津染色评分略有改善但不显著，接受PRP的患者的Schirmer检验差异显著高于接受AS的患者，PRP滴眼液在治疗1个月后显著改善了BCVA。
本研究表明，PRP和AS都含有已知在细胞迁移、细胞增殖和伤口愈合中起重要作用的上皮营养因子，EGF、纤连蛋白、PDGF-AB和TGF-β1在-20°C下储存至少3个月后浓度不会降低，确定PRP和AS治疗DED是安全有效的。
患者在冷冻或冷藏后使用PRP可能比新鲜制剂更有益，4°C储存时PRP中的EGF、纤连蛋白和PDGF-AB浓度显著增加，EGF从基线增加到超过AS中的浓度约3倍，PRP中的EGF在-20°C储存后比基线增加近3倍，这些上皮营养因子的增加可能是PRP中血小板的活化作用产生。
PRP和AS均有改善DED患者症状和体征的作用，但PRP可能优于AS治疗，PRP治疗能显著改善干眼问卷评分、OSDI评分和BCVA，与基线相比AS治疗组仅观察到OSDI评分的改善，对于 Schirmer 的测试组间比较时，PRP治疗的眼睛比AS治疗的眼睛显著改善。
来源：Comparison of epitheliotrophic factors in platelet rich plasmaversus autologous serum and their treatment efcacy in dry eye disease. ScientifcReports,2022,12:8906.
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