湖北地区克氏原螯虾白斑综合征监测及防控措施
近年来，由于克氏原螯虾养殖效益可观，湖北省克氏原螯虾养殖业迅速发展。然而，从2008年5月开始，多个地区发生白斑综合征病毒病(WSD)，造成了较大经济损失。本研究于 2016－2017年，对湖北省克氏原螯虾白斑综合征病毒进行了监测，并试验了白斑征综合防控措施。
小龙虾
一、材料与方法
1.样品采集及养殖环境调查
2016－2017年，对湖北省39个养殖克氏原螯虾的主要县(市、区)的大型养殖场进行采样，每年采样50份，两年共100份样品进行分析，每份样品数量 150 尾，规格为 8～12 厘米，样品虾鲜活、无典型发病症状。在取样过程中，测量和记录养殖池水的常规水质指标，了解克氏原螯虾的养殖过程、养殖管理等情况。
2.分子生物学检测
对样品的WSSV进行PCR检测，方法参照国家标准GB/T 28630.2-2012《白斑综合征(WSD)诊断规程第2部分：套式PCR 检测法》检测。
检测样品第一步PCR扩增后在1447 bp处有条带或第二步PCR扩增后在941bp处有条带均判定为阳性。
路易斯安那州的沼泽小龙虾克氏原螯虾
二、结果与分析
1.样品检测结果
2016、 2017 年 每 年 采 集 克 氏 原 螯 虾 样 品50份，监测采样点集中在池塘与稻田。2016年监测样品50个，检测出携带病毒样品22个，阳性率为44%；其中春季样品37个，检出18个阳性，春季的阳性率为48.65%，秋季样品13个，检出4个阳性，秋季阳性率为 30.77%。2017 年监测样品50 个，检测出携带病毒样品 20 个，阳性率 40%；春季样品47个，检出17个阳性，春季的阳性率为34%，秋季样品3个，检测结果全部呈阳性，秋季阳性率为100%。阳性样品PCR扩增产物与白斑综合征病毒的基因序列相似度为99.6%～99.9%。
2.阳性分布
通过对100个样品分子生物学检测，共检测出40个样品携带白斑综合征病毒，说明白斑综合征病毒在湖北省已广泛存在。阳性率偏高的地区主要集中在黄冈地区和荆州地区。部分县市连续两年监测到阳性，甚至两年在同一池塘监测到阳性。值得注意的是，所有采集的克氏原螯虾样品体表并没有明显的发病症状，兰江风等认为WSSV在克氏原螯虾体内发病是条件性的，只有在特定条件下才会诱发该病发生。也许在养殖环境恶化、营养不平衡等因素的作用下，才能诱导克氏原螯虾暴发WSSV疾病。
克氏原螯虾白斑综合征的发病水温一般为20～28℃。从近年克氏原螯虾的养殖生产看，该疫病仅在局部地区小面积发生，湖北尚未暴发大规模克氏原螯虾白斑综合征的疫情。从监测结果看，我省克氏原螯虾WSSV病毒携带情况比较多。通过两年专项监测发现，我省目前有枝江市、武汉市江夏区、孝感市孝南区、随县、团风县、沙洋县、蕲春县、云梦县、随州市曾都区、阳新县、老河口市、安陆市、黄冈市黄州区等13个地方的克氏原螯虾不携带WSSV，其余各采样点均不同程度携带WSSV。为防止克氏原螯虾暴发大规模疫病，农业部已经加强对白斑综合征病毒的监测，要求加强有关防控工作。
通过对阳性样品的流行病学调查，大多数苗种都是从各地购置，来源复杂，质量难以保证。因此建议我省尽早开展苗种产地检疫，引种时最好对苗种进行WSD检测，确保投放的苗种不携带WSSV病毒。
小龙虾
三、克氏原螯虾白斑综合征防控措施
1.选育优质苗种
我省克氏原螯虾苗种大多是养殖户自繁自育，种虾没有严格按照繁育程序筛选培育，养殖池内近亲繁殖的概率大大增加，造成种质不断退化，成虾个体偏小、抱卵量减少、性成熟时间提前、抗病能力下降等，虾苗质量直接影响其生长品质及免疫力。要解决这个问题，必须要选用健康的虾苗，严格筛选和培育抗病力强的品种。
2.调整养殖结构
生态养殖是近年来兴起的一种养殖方式，将生物与环境有机结合在一起，以预防为主，因地制宜合理利用生物与生物、生物与环境之间的自然关系进行综合治理。在养殖过程中最大限度利用生态环境预防白斑综合征的发生，同时加强养殖过程的管理，科学地控制养殖密度，给养殖水体中克氏原螯虾提供充足的空间和优良的环境，并按照科学的方法采取混养、轮养、间养等养殖模式。
3.切断病毒传播途径
虾苗投放前一定要彻底清理池塘、晒干池底并使用消毒剂消毒，杀灭白斑综合征病原及中间宿主，并定期改良池塘底质。一旦发现白斑综合征流行，应迅速采取隔离措施，并及时处理病虾，进行消毒处理。对于曾经暴发过白斑综合征病毒病的养殖池塘要加强消毒清理工作。
4.严格实施苗种产地检疫
加强对种苗场的监管，对辖区内苗种场、良种场实行防疫条件审核、建立健全苗种生产许可管理制度，防止带毒苗种和抗病力较弱的苗种流入市场。
5.营造良好的生态环境
做到合理放养，科学用水和管水，不滥用药物，改善和优化养殖水环境，促进水生动物正常生长和发育。使用无病原污染的水源，在放养前池塘要彻底清淤消毒。水草不仅是小龙虾的天然饵料，又是其栖息蜕壳场所，且对遮蔽光照、改善水环境有重要作用。在池塘中种植喜食的水生植物，有利于养殖小龙虾的健康生长与保持较强抵抗力。此外定期泼洒生石灰，改善水质和底质，或定期泼洒光合细菌、芽孢杆菌等微生态制剂，调节养殖水域微生态环境，对于克氏原螯虾的健康养殖十分重要。
坚持经常巡塘，仔细观察克氏原螯虾的活动与摄食情况，及时捞出有病和死亡的克氏原螯虾。一旦发生传染性疾病，首先应采取严格的隔离制度，防止疫病传播、蔓延。同时要做到对苗种、工具、饲料及食场实施严格消毒措施。
6.建议推广快速检测技术
国内外多家科研机构都在积极研发虾WSD等病毒病的快速检测试剂盒，目前已有单位研究出相关试剂盒，并在临床上推广应用，对渔民有一定帮助。该方法操作过程简单，养殖户经过简单的培训，就可以就近对病原进行快速诊断，1小时内判定有无病毒感染，真正实现池塘边检测，从源头上控制疾病的暴发，将经济损失降至最低。
小龙虾红析构函数，Yabbie 淡水螯虾的手
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