一、什么是转染?
从广义上讲,转染是采用除病毒感染外的其他方法将核酸(DNA或RNA)人工导入细胞的过程。采用各种化学、生物学或物理方法导入外源性核酸会改变细胞的特性,从而实现细胞基因功能和蛋白质表达研究。转染后,导入的核酸可以瞬时性地存在于细胞内,只表达一段时间且不会复制,也可以稳定地整合至受体基因组内,随着宿主基因组的复制而复制,各种基因输送系统采用的术语与该领域的技术进展步调一致,并进一步区分不同的方法和细胞类型。
1、转染
转染通常是指将核酸输送到真核细胞,或者更明确地说是输送到动物细胞内。术语转染一般用来表示原核生物感染病毒或噬菌体中病毒核酸的摄取,导致成熟病毒颗粒的感染和生成。但该术语现在的含义包括将外源性核酸人工导入细胞内。
2、转化
转化通常用来描述细菌、非动物真核细胞和植物细胞中非病毒DNA的转移。但是,转化还表示引起动物细胞表型发生性改变的特定事件或一系列事件,暗示遗传不稳定性及发展为癌症状态。尽管从这个意义上讲,转化可以源于转化病毒的感染或基因转染,也可以同时发生或在外来刺激物(如离子辐射或化学致突变源)刺激下产生。因此,在描述外源性遗传物质导入时,应避免将该术语用于动物细胞。
3、转导
转导用于描述病毒介导的DNA转移。但是,术语转染也可以表示细胞的病毒核酸(从真核细胞病毒或噬菌体中分离)感染。
转染的两个主要目的是生成重组蛋白,或特异性地提升或抑制转染细胞中的基因表达。因此,转染是一种功能强大的分析工具,可用于基因或基因产物的功能和调控研究,用于生成转基因生物,并用作基因治疗方法。
转染 转化 转导区别:
1、作用不同
转化是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。
转导由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。
转染是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。
2、特点不同
转化是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体感染传递遗传物质的转导以及通过细菌细胞的接触而转移DNA的细菌接合。
转导是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。
转染关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。
3、功能不同
转化的研究不但在理论上有重要意义,而且在基因工程中是将质粒或病毒载体引入宿主细胞的一种重要手段。它也可能为育种和遗传性疾病的基因治疗提供新的途径。
应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。
转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。
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