实验室如何制备血清和血浆(血清及血浆样本制备及检验和科研用途)(1)

血液,因其组分的不同可以做不同的项目,那么全血、血浆和血清之间到底有什么区别呢?又分别适合用于哪些检测项目和科研项目呢?

血液的组成(1)血液有血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成。(2)离体后未抗凝处理的血液会自然凝固(或离心时),分离出上层淡黄色透明液体为血清,中间层白色固体为白细胞和血小板,最下层红色固体为红细胞。

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血液组成

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全血、血浆、血清

1.全血

1.1全血的概念

血液:由液体成分的血浆和悬浮于其中的知血细胞组成,合称为全血。简单来说全血就是指血液,由血细胞 血浆组成。应用于血液学检查,如红细胞计数、分类和形态学检查等。

全血中水占比81%,而血浆中水占93%。血中某些可溶于水的物质如葡萄糖、尿素、氮等,用血浆测定比用全血测定高,尤以红细胞压积显著升高。目前检验用血样本,除了血细胞检查、血培养等少数项目用全血外,其他生化、免疫、肿瘤标记物等检测多采用血清或血浆测定。

血清或血浆中的生理成分与机体组织间液比较接近,更能真实地反应机体的生理情况,反应其病理改变也更加灵敏。

1.2全血的获得

使用烘干的肝素管或者有少量液体的肝素抗凝管,得全血。

1.3全血的分类

全血分类静脉全血:应用最多的全血(whole blood)血液标本来自静脉,采血的部位有肘前静脉、腕静脉,小儿和新生儿有时用颈静脉和股静脉。

动脉全血:主要用于血气分析,采血部位有股动脉、肱动脉和桡动脉。

毛细血管全血:也称皮肤采血,适用于仅需微量血液的检验或婴幼儿,采取的部位有耳垂、指端,小儿有时为拇趾或足跟。

1.4全血的检测项目

主要检测项目血氨(BA)、血液酸碱度(PH)二氧化碳分压(PaO2)、氧分压(PaO2)碳酸氢盐、血沉ESR、血糖BG、二氧化碳结合力、非蛋白氮(NPN)尿素氮(BuN)、红细胞比积(Hct)肌酐(Cr)、肌酸(Cre)凝血酶元活动度及时间(PT)纤维蛋白元(Fb)E-玫瑰花结形成试验(ERT)HDL-胆固醇、甲状腺功能测定乙肝两对半、血型鉴定等。

1.5全血的科研用途

例如全血中环孢素A的血药浓度的测定。

2.血浆

2.1血浆的概念

离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成道分的液体,即血浆。含有血细胞及其有形成分及多种生理物质和代谢产物,比如凝血因子I(纤维蛋白原)、II(凝血酶原)、V、VIII等。

应用于血浆生理性和病理性化学成分的测定,快速生化试验、血糖试验、特别是内分泌基数测定,血栓与止血的检查。

2.2血浆的分离

使用烘干的肝素管或者有少量液体的肝素抗凝管,将得到的全血与抗凝剂充分混匀,经过3000rpm离心力10分钟得到的上清即为血浆样本。

2.3血浆的检测项目

主要检测项目血浆生理性和病理性化学成分的测定快速生化试验、血糖试验特别是内分泌基数测定,血栓与止血的检查等等(用于血清检测的项目大部分能用血浆样本,但是由于在析出血清时纤维蛋白原在凝血的过程中会聚集大部分细胞形成血凝块,而在析出血浆时,就相对均一,因此在进行细胞类分析或胞内病毒检测项目时较优先使用血浆样本)

2.4科研应用

例如测定血浆中吗啡的浓度。

3.血清

3.1血清的概念

离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,即血清。粗略的说,血清与血浆的区别,主要在于血清不含纤维蛋白原。

3.2血清的分离

取得血液后,在EP管中室温静置一小时以上(或37°水浴1小时,4°冰箱静置2小时或者过夜)以3000rpm离心10分钟,上清液即为血清。可在-80°保存。

3.3血清的检测项目

主要检测项目丙氨酸氨基转移酶(ALT)门冬氨酸氨基转移酶(AST)胎儿甲种球蛋白(AFP)乙肝表面抗原(HBsAg)黄疸指数、总胆红素(TBIL)总胆固醇(Chol)、胆固醇酯(Choiesl)三酸甘油酯(TC)、血清蛋白(A/G)蛋白电泳(SPE)、碱性磷酸酶(AKP)血清淀粉酶(AMS)、乳酸脱氢酶(LDH)血钾(K)、血钠(Na)、血钙(Ca)血氯化物、γ-谷氨酰转肽酶肥达氏反应、抗O(ASO)、红斑狼疮细胞甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、PCR

TORCH、肿瘤标记物、血清免疫学等等。

3.4血清的科研应用

例如本科学生实验中阿司匹林血药浓度测定是用的血清。

一点浅见:一般等体积的全血,加入抗凝剂后获得血浆,不加抗凝剂则得血清,而血浆的量稍多于血清,但干扰可能相对多点。

国外一般用血清多一些,鄙人认为两者皆可,并非"血浆蛋白结合率高的药物不能用血清"。因为药物在血浆或血清中的量是与全血中的量成一定比例关系的。具体情况请参考李好枝编"体内药物分析"一书,有非常清楚的描述。

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