丁酸梭菌（Clostridium butyricum）又名酪酸梭菌、丁酸梭状芽孢杆菌，是芽孢杆菌 科、梭菌属的一种产丁酸、革兰氏阳性厌氧细菌。 1933年日本千叶医学院Miyairy博士首次从粪便中分离出了丁酸梭菌，随后发现其培养物中含有少量的脂肪酸，可抑制肠道中有害菌生长并促进有益菌的生长。 丁酸梭菌被广泛用作人肠炎治疗药物、食品添加剂、兽药和饲料添加剂。 在韩国和日本，丁酸梭菌早已被用作畜禽饲料添加剂，中国于2009年批准丁酸梭菌为新饲料添加剂。
1 实验材料
共培养用液体培养基；LB培养基
2 实验方法
2.1 丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌的抑制作用
①霍乱沙门氏菌种子培养
取平板活化好的菌种转接到LB液体三角瓶中，装液量25 mL/100 mL， 37℃，150 r/min培养12-24h，取培养菌液测活菌数和pH值。
②丁酸梭菌单独培养
取丁酸梭菌菌粉0.1 g接种到装量为25 mL/30mL的细菌培养瓶中，置于37℃静止恒温培养24 h左右。（可按此比例扩大培养体积，最低比例为0.1 g：25 mL）
③丁酸梭菌和霍乱沙门氏菌混合培养
活化好的丁酸梭菌培养液1 mL接种到装液量为20 mL/30mL的细菌培养瓶中，再把培养好的霍乱沙门氏菌菌液1 mL同时接入该共培养液中， 37℃恒温静止培养。对照组为向同样的共培养液体培养基中（装液量为20 mL/30 mL）接种霍乱沙门氏菌菌液1 mL，37℃恒温静止培养。分别在16和24 h测pH值及沙门氏菌活菌数。
④计数采用平板涂布法
选择2～3个适宜梯度稀释液，吸取100 μL涂布平板，倒置于严格厌氧培养箱或严格厌氧培养袋中，37℃培养18～36 h后计数。每个梯度做两个平行，每个平板的菌落数在30～300范围内有效。
2.2 丁酸梭菌对肠出血性大肠杆菌、魏氏梭菌的抑制作用
实验方法同上，魏氏梭菌种子液为严格厌氧，应采用共培养液体培养基。
3 实验结果
3.1 对霍乱沙门氏菌的抑制结果
丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌表现出非常强的抑制作用，24h活菌数从单独培养时2.0×108CFU/mL减少到1.2×103CFU/mL。
3.2 对肠出血性大肠杆菌的抑制结果
混合培养16h，肠出血性大肠杆菌活菌数从单独培养时3.5×108CFU/mL减少到7×106 CFU/mL，24 h活菌数减少到0.4×106 CFU/mL，pH从6.8下降至4.6，呈现良好抑制作用。
3.3 对魏氏梭菌的抑制作用
混合培养后，魏氏梭菌活菌数从单独培养时的1×108 CFU/mL减少到1×10 5 CFU/mL， pH值从6.8下降到4.5，表现出良好的抑制作用。
4 小结
（1）丁酸梭菌为严格厌氧菌，产氢气。液体培养基中加入厌氧指示剂，粉红色表明培养基上层有氧；
培养一段时候后液体表面有气泡，为正常现象。
（2）丁酸梭菌平板形态如下。
（3）丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌、肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌均有显著的抑制作用，可将肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌细菌含量控制在发病浓度之下，防止发病。尤其是对霍乱沙门氏菌抑制作用更强，可以达到净化霍乱沙门氏菌的作用。
5、结论
益生菌可以使糖类发酵形成有机酸和短链脂肪酸，这些酸能维持酸性环境，降低肠道的 pH 值，防止病原菌及腐败菌在肠道内异常增殖，减少肠毒素。此外，益生菌还可产生醇、过氧化氢等物质，合成溶菌酶、细菌素和抗菌肽等抗菌物质，达到对致病菌的抑制作用。故丁酸梭菌可以有效抑制沙门氏菌、大肠杆菌、魏氏梭菌的生长。
