近两年,蛭弧菌冻干粉市突然大热起来。细思下来,一方面水产养殖的密度在增加,各种未知疾病或者混合型疾病日益增多;另一方面,从公司至经销商再到养殖户,面对日益增加又难以查明的疾病,多数是束手无策,很多化学型消毒剂,效果来的快去的也快,有时候刺激也大一些,而且也不能总是经常使用,因此蛭弧菌又重新被大家推广起来。

养虾用的活力菌有哪些(水产养殖的有新救星)(1)

我们近期刚得知,江苏南京新的生物制品有限公司于10月中旬在蛭弧菌冻干上面投入近百万采购了一台大型冻干机(单次冻干1万瓶),实现了从蛭弧菌母液发酵到冻干全过程的可控制。南京新的生物制品有限公司的现在年销售额在1500万左右,这种近百万的大型冻干机投入到底划算不划算?为此我们采访了南京新的生物制品有限公司负责水产事业版块的赵经理,希望就蛭弧菌的冻干产品做一些了解。

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蛭弧菌原装冻干

水产前沿:蛭弧菌和普通微生物产品到底有什么不同?

赵经理:首先,效果表达的途径不一样。普通微生物在水产养殖上发挥效果大多数是通过“占位理论”实现的(在体外或体内),或者通过分泌胞外物质抑制其他微生物繁殖而发挥效果。蛭弧菌不是,蛭弧菌具有“不服则干”的特性,其通过寄生和裂解的生理手段,能在体外直接杀灭一些有害菌,还能在体内发挥有益微生物的效果,这使得蛭弧菌有着益生素和“活性抗生素”的双重特性。

其次,在发酵上面,普通微生物发酵是在人工合成的培养基里接种菌种。而蛭弧菌发酵则要先生产大肠杆菌,提供宿主菌,再接种蛭弧菌种。

另外,普通的微生物一般是通过无性二分裂方式繁殖,而蛭弧菌是通过复制的方式繁殖。前者繁殖速度很快,后者的速度较慢。

水产前沿:蛭弧菌产品在行业内曾经火过,但又销声匿迹,到现在又重新火起来了,你认为是什么原因呢?这对于蛭弧菌系列产品有什么影响呢?

赵经理:水产蛭弧菌在上世纪90年代就应用于水产上了,2000年初的时候福润德曾靠“三联噬菌皇”风行水产业界,但后来蛭弧菌又销声匿迹了很久,这几年随着业内几家公司的推广,又重新火了起来。

这里面除了公司的一些推广之外,还有一些原因是需要我们了解的。

实际上,我们认为,2000年初之所以能推广起来,是因为蛭弧菌这个产品的概念新,也能见到效果,但之所以又沉寂下去,是因为效果慢,比不过消毒剂,而且没有系统的研究实际使用方法,做不到最大效果化,从而市场整体性认可性不好,尤其是2000年初还是化学消毒剂大行其道的时候,这对蛭弧菌的冲击就更大了一些。

之所以近两年又重新热了起来,也是和大环境和产品本身有关系,一则消毒剂这两年大家都谨慎使用,而疾病又呈现多样化,我们希望有安全可控的产品出现。另外,作为生物消毒剂的蛭弧菌确实有其本身的特点,尤其是安全,再加上替抗的一些概念的提出,同时冻干这个工艺的成本也大幅度降低,从而成品的活性、效果都有了较好的保留,这为市场的推广做了很好的铺垫,从而有了蛭弧菌冻干粉的又一次大热。

同时从产品的系列上来讲,蛭弧菌产品有稀释液、母液、冻干粉、原装冻干等四大系列,

总体来说,蛭弧菌产品在功效上是明确的,水产动保行业也是需要的,但我们要从生产的基本技术上提升产品质量,首先做好质量的保障,再从实际应用层面出发,探索最适合蛭弧菌产品的一些使用方法,争取让一个好的产品健康的生存在动保行业中。

新的目前重点在于推广蛭弧菌“原装冻干”产品,原装冻干可以保证蛭弧菌产品的活性最大化,同时因为在冻干机内就完成了封瓶,所以冻干瓶内仍保持真空状态,这对蛭弧菌产品的保护也是最佳的,能大大延长产品的保质期。

水产前沿:南京新的生物制品有限公司是如何进入蛭弧菌生产这个版块的?

赵经理:南京新的生物制品有限公司成立于2007年,实际上在成立之前,公司创始人徐丽女士就已经接触过蛭弧菌,成立企业之后,新的生物在蛭弧菌的生产、研发上也没有停止过,但随着蛭弧菌大行情的波动,公司只能在代工上重点发力,一直为兄弟单位提供蛭弧菌母液及稀释液等产品,而近两年随着冻干成本的不断下降,产品的保存期得到了质的突破,活性也基本是完美保留,于是公司进一步的增加了投入,上了蛭弧菌原装冻干设备,让产品升级换代。

水产前沿:为什么南京新的生物在冻干设备上投入近百万,这是一笔非常大的开资了,目前行业内做蛭弧菌的企业好像还没有人这样做,请问这样的投资是一种理性的行为么?

赵经理:南京新的生物制品有限公司之所以在冻干设备上投入如此资金,主要是考虑以下几点:

1、南京新的生物生产蛭弧菌已有10多年的时间,蛭弧菌产品的演变也一直非常关注,最早的液体产品,我们就一直用发酵罐进行生产,但是液体产品的保藏始终面临一些天花板问题,这对实际使用效果有非常大的影响,南京新的生物也一直在思考如何突破技术和成本的双重难关,而冻干则是最好的一种保存方式。

2、我们一直在关注冻干,也组织了专家对冻干产品的原理及与蛭弧菌的结合做了论证,早期主要是硬件的成本投资太高,同时产品销量预估受第一阶段蛭弧菌下降的影响,未敢一次性投入,于是采取代工的形式生产蛭弧菌冻干粉,此期间,我们做了大量的试验,确保了蛭弧菌冻干粉产品的稳定性,同时也确定了蛭弧菌原装冻干在产品保质期上的突破具有无与伦比的优势。

3、近两年养殖密度整体是呈现上升趋势,而且生态防控这个概念也不断加强,水体内的总菌数、异养菌数、弧菌数的控制变成一个难题,只依靠化学类消毒剂无法完成这个工作,因为化学消毒剂效果来得很快,但去的也很快,而蛭弧菌恰恰可以弥补这个缺陷,因为蛭弧菌的缺点是效果来得慢一些,但是中后期的防控时间特别长,其发挥的效果基本可以达到15天左右,同时再加上成品质量的稳定性在不断进步,所以使用效果上面得到了较好的体现,产品的总量也在增加。

4、我们本身有很多的代工客户,很多都是在我们公司代工生产蛭弧菌液体,这两年随着市场对蛭弧菌冻干粉的呼声越发高涨,他们也在催促我们上一台冻干机,可以让他们有更多的选择。

综合以上几个方面,公司在2018年下定决心,于10月份采购了一台价值近百万的大型冻干机,以完成从蛭弧菌母液发酵至蛭弧菌冻干的全程掌控,从而能为客户提供稳定的蛭弧菌原装冻干产品。

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图1,蛭弧菌发酵罐

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图2,冻干机侧面一

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图3,冻干机侧面二

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图4,冻干机正面

水产前沿:请介绍下蛭弧菌冻干的全过程

赵经理:主要分为以下几个过程:

第一、蛭弧菌发酵

首先,我们要完成蛭弧菌母液的发酵,获得稳定的蛭弧菌液体。

第二、添加保护剂

将脱脂奶粉等保护剂与蛭弧菌母液进行混合,做好冻干前的保护工作。

第三、摆盘装瓶

所有的西林瓶在大盘中摆好,同时将加好保护剂的母液装入西林瓶中,并将瓶盖不完全盖上,保持瓶内、外的通气状态。

第四、冻干压盖

直接进入冻干机中,通过冻结、升华、再干燥三个过程,通过升华过程将母液中的冰几乎全部散发掉后,再由机器统一压盖,保证瓶内处于“真空”状态。

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第一步:灌装

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第二步:装盖

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第三步:摆盘

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第四步:冻干

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第五步:原装冻干成品

水产前沿:您认为蛭弧菌“原装冻干”有哪些产品优势?产品的稳定性又如何保障?

赵经理:目前蛭弧菌类产品基本上有两类,一是液体,一是冻干粉。

蛭弧菌液体的产品始终面临保存的问题,实际上也有很多的论文对此做了研究,有的文章指出,大多数的液体蛭弧菌产品在4℃的环境下,可以保存8个月以上,少数6个月以上。但在25℃的环境下,蛭弧菌液体产品的保质一般只在4-6个月了。当然随着保护剂的不断研发,随着添加不同的保护剂,在4℃的环境下,某些液体产品的保质期可以达到15个月以上,有的可以达到两年以上,但是所有的保存环境温度都指向4℃,这对我们实际的销售场景是不太相符的。当然,液体也有好处,菌种复苏时间快,如果从实际销售出发,建议在经销点增设冷藏柜,这样可以延长液体产品的保持期。

另外,就要谈到目前大家所接触比较多的蛭弧菌冻干产品了,尤其是强调蛭弧菌原装冻干产品。在相关的研究中,4℃的环境下,添加了保护剂的蛭弧菌液体产品在13个月后其复苏率为100%,而同样的环境下,冻干产品在21个月后其复苏率仍为100%。

而且真正的蛭弧菌原装冻干产品,具有以下优点:

1、冷冻干燥生产工艺是在低温下进行的,对于许多热敏性的物质特别适用。蛭弧菌不会发生变性或失去生物活力,这一点非常重要。

2、整个冷冻生产过程基本上是在低温真空状态下完成的,在这种状态下,微生物的生长和酶作用是受到抑制的,可以很好的保证蛭弧菌产品的稳定性。

3、因在真空下操作,氧气极少,因此,一些易氧化的物质(如油脂类)得到保护。

4、冷冻干燥法能排除95%~99%以上的水分,产品能长期保存而不变质。

以上就是蛭弧菌冻干产品的优势所在,也是其稳定性的保障所在。

水产前沿:蛭弧菌原装冻干产品有什么特征?

赵经理:市面上有很多处蛭弧菌冻干粉,有很多是呈现流动性粉状的,也有一些是块状的,可能是生产工艺有所差别,但我们还是认为“原装冻干”是一种最好的工艺,最主要是原装冻干是在冻干机内完成封装的,瓶内保持着真空冻干状态,能最大可能的保存产品的活性,提供产品最好的稳定性,原装冻干产品一般有以下几个特征:

第一、产品在小的西林瓶中呈现的是一种块状物,用手拿起瓶子晃动,感觉像一块小小的泡沫,有很轻的感觉。另外,就是西林瓶装的原装冻干产品肯定不可能是粉剂。

第二、原装冻干和非原装冻干产品在包装上也有所差异,虽然都是西林装封装的,但是两种产品封装的瓶盖都会存在明显差异,主要的原因在于冻干的过程中需要做适当保护,不能直接将液体暴露在环境中,需要在西林瓶上进行遮盖,但完全遮盖是不行的,这会阻挡冰的升华,所以需要用一种带导气槽的橡胶皮塞进行半遮盖,让瓶内、外的空气可以流动,不会阻挡冰的升华,而在一般环境下生产的产品是不需要用这种带导气槽的橡胶皮塞的,差异还是很明显的,如下图:

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第三、去掉西林瓶盖上的塑料和铝包片后,只留下橡胶瓶盖的时候,用手拔出橡胶瓶盖的时候,你会明显的听到“嘣”的一声,可以看到冻干的块状物在瓶中的跳动,主要的原因,是因为原装冻干是在冻干机中直接完成封盖的过程,瓶体中是处于一种真空状态的,因此在拔出瓶盖时,因为瓶内、外压力的差异极大,空气的快速流动引起了“嘣”的声音产生,同时块状物会跳动。

第四、极易吸水,1秒溶解。直接的表现就是将水倒进小瓶内,小瓶里的物料1秒就溶解完了,而且溶解均匀。实际上,这主要因为被干燥物料含有的水分是在冻结状态下直接蒸发的,故在干燥过程中,水汽不带动可溶性物质移向物料表面,不会在物料表面沉积盐类,即在物料表面不会形成硬质薄皮,亦不存在因中心水分移向物料表面时对细胞或纤维产生的张力,不会使物料干燥后因收缩引起变形,故极易吸水恢复原状。

水产前沿:请问蛭弧菌在水产养殖中如何合理应用呢?

赵经理:任何一种产品要研究其如何应用,肯定是分两个层面进行探究,一是要符合产品的基本特性,不能违背基本规律;二是在实际应用场景中,要和现实相结合,寻找最佳的使用方法。

我们首先要了解蛭弧菌的几个特性:蛭弧菌的生长,一般要求pH6.0-8.5;温度23-37℃,低于12℃,高于42℃时均不生长;能稳定分解蛋白质,一般不利用碳水化合物,而以肽、氨基酸作碳源和能源;能液化明胶;严格好氧。同时蛭弧菌的靶向性问题并没有很多的研究,但总体上其偏向革兰氏阴性杆菌,只裂解较为少数的革兰氏阳性杆菌。同时蛭弧菌的安全性也得到了一些论文的验证,迄今为止,相关报道表明蛭弧菌对人和某些动物无毒害作用。

——所以在实际使用中需要注意以下几点:

第一、温度不在适宜范围的时候,蛭弧菌生长是非常缓慢的,所以使用时要充分考虑这一点。比如3、4月份用它去泡苗,效果肯定不会好,但如果改成拌料投喂,则会对肠道控菌产生积极影响。总体来说,蛭弧菌使用主要分为内服和外泼两个方面,内服不受温度限制,而外泼则要考虑温度问题。

第二、蛭弧菌的繁殖是需要氧气的,使用的时候也建议在早上8-10点使用,这样可以获得较为充足的溶氧。另外,其耗氧不会达到非常剧烈的程度,因为其繁殖代时一般要4-6小时。

第三、蛭弧菌的安全性应该如何得到最大化的利用呢?

实际上,我们重点推荐在甲壳类动物脱壳期使用蛭弧菌产品,因为甲壳类动物在脱壳期是非常虚弱的,也极易被一些有害菌感染,控菌工作非常重要,但是一些化学消毒剂存在刺激性,同时来的快、去的快,意义不大。而蛭弧菌则完美的解决了这个问题,其几乎没有刺激性,控菌时间又长,只不过要求我们需要提前2-3天使用即可,如果在使用补钙制剂后再使用蛭弧菌,可能繁殖效果会更好,控菌效果也会更明显。

蛭弧菌在脱壳期的使用应该是我们要重点了解的。

第四、配合化学消毒剂治疗暴发性疾病。

在5-8月份,往往有一些季节性暴发的疾病,存在着难治疗、易反复等特点,而在使用化学消毒剂的时候,往往存在来得快、去得快的问题,这应该是易反复的主要原因,这个时候,就可以将化学消毒剂与蛭弧菌配合使用了,因为蛭弧菌在这方面有自己的特性:其见效慢,但见效长——见效慢是因为刚繁殖的时候,蛭弧菌需要时间,一般是24-48小时才见效;见效长,则是在很多研究中都指明,蛭弧菌控制有害菌的时间可以长达15天左右。

因此即当使用化学消毒剂见效后,在12小时以后即可使用蛭弧菌类产品,每天一次,连续2次左右,这样水体的短期、长期控菌就可以做到更好。

第五、定期预防应该如何使用?

定期预防几个关键问题,比如能不能和其他微生物一起使用?多少天使用一次?在上面蛭弧菌的特性中,我们谈到其偏向革兰氏阴性菌,相对裂解较少的革兰氏阳性菌。

实际上徐琴等人(2009)的研究指出,加噬菌蛭弧菌和黏红酵母组的试验效果不理想,表明这两株菌体之间有一定的拮抗作用。而联合使用噬菌蛭弧菌和球形红假单胞菌(是紫色非硫光合细菌红假单胞菌属的一个种)组展示了净化水质,预防病害的优良前景,此组能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物质。这也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合细菌直接混合使用的,这一点大大提高了使用的方便性。

另外,陈家长等人(2003年)曾在螃蟹养殖中,间隔使用光合细菌和蛭弧菌:每20天用噬菌蛭弧菌和光合细菌各1次,使用方法为使用光合细菌1周后使用噬菌蛭弧菌,实验周期3个月。其中蛭弧菌浓度为107cfu/mL,光合细菌为109cfu/mL。这样间隔使用的效果也非常不错,25d后养殖中华绒螯蟹验组比对照组池塘中的细菌总数少2个数量级,70d后实验组比对照组池塘中的细菌总数少3个数量级,另外试验池塘的COD、氨氮及硫化物有明显的降低,有效的提高了中华绒螯蟹的成活率,但是本文并没有探讨如何混合使用。

总体来说,如果出于预防考虑,和其他微生物可以间隔使用,这样最最安全。当然如果真要混合使用,可以考虑和一些光合细菌配合,基本上不要考虑酵母或乳酸菌的混合使用了。

另外,间隔使用的话,可以考虑上边陈家长等人的方案,即7天用一次其他有益菌,之后再使用蛭弧菌,14天之后再用其他有益菌——形成一个使用循环,效果更佳。

结语:国内发酵蛭弧菌的公司本身就不是很多,同时拥有大型冻干机的公司更是少之又少,新的经过多年的摸索,完成了蛭弧菌制种、发酵及冻干的全生产过程,能为客户提供真正的蛭弧菌“原装冻干”产品,同时做到质量可靠、效果稳定,同时竭诚欢迎新老客户垂询和参观指导。

公司名称:南京新的生物制品有限公司

公司地址:江苏省南京市江宁区淳化街道

联系人:赵经理13813362881(微信同号),025-52283496

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