血液分析仪是目前临床血液一般检查最常用的检测仪器,以往使用手工操作显微镜计数方法,由于操作过程的随机误差,实验器材的系统错误和检测方法的固有误差,使显微镜法细胞计数的实验结果准确性受到很大影响。20世纪40年代后期,美国人库尔特先生发明并申请了粒子计数技术的设计专利;50世纪初期,电子血细胞计数仪开始应用于临床,开创了血细胞分析仪的新纪元。随着基础医学的发展,高新科技的应用,特别是计算机技术的应用,血细胞分析仪的分析技术及临床应用都取得了令人瞩目的进展。现在的血细胞分析仪一般能为临床疾病诊断、鉴别诊断、治疗和疗效观察提供十几项至几十项检测参数。进入21世纪以来,我国的各级医院已基本普及了血细胞分析仪,使血细胞分析的质量有了明显的提高,同时,过于机械的工作方式降低了对专业知识的要求,出现了诸如过分相信仪器结果等一些问题。现结合我国血细胞分析仪使用现状,概述在仪器使用中应注意的几个问题。
1,标本采集及抗凝剂的使用
标本采集及抗凝剂的使用是血细胞分析仪使用前的质量控制关键问题,十分重要,但是人们往往不重视。血液标本采集与抗凝剂对血细胞分析结果的准确性影响非常大,例如采血不顺利或抗凝效果差常导致血小板计数减少;同时,采血不顺利、血标本中存在肉眼不易发现的小凝块可导致血细胞分析仪的计数孔不完全或完全堵塞。计数孔不完全堵塞,不容易发现,易造成血标本检测结果的误差。标本采集涉及的问题主要是用手指血还是静脉血?用真空采血器还是普通注射器?推荐使用静脉血和真空血管采集标本? 。血细胞分析最适抗凝剂为EDTA盐,它对血细胞形态和血小板计数影响很小,国际血液与标准仪委员会(ICSH)1993年文件建议,血细胞分析用EDTA-K2作抗凝剂,用量为1.5~2.2 mg/mL血液。同时应注意EDTA依赖性血小板聚集可导致假性血小板减少,主要见于肿瘤、自身免疫病、肺心病、晚期妊娠、肝病、毒血症及一些不明原因疾病L2J,遇到上述情况,应该使用草酸铵稀释液等方法计数血小板。
2,血细胞分析仪
对细胞分群是过筛手段血细胞分析仪已从单一的电阻抗技术发展成多种技术包括物理、化学、免疫学、流式细胞术等结合的全自动先进仪器,对各种血细胞分析结果更加准确可靠,自动化程度由单一的三压分群发展为血细胞自动分析系统,即全血细胞计数、网织红细胞计数、外周血推片和染色等过程的全自动化。但是,至今任何血细胞分析仪对血细胞分群只能是过筛手段,在存在幼稚细胞等情况下,其分析结果不可靠,必需行人工显微镜复查。目前,国内许多医院检验科对于血细胞计数及细胞直方图异常时,基本不复查或很少进行人工显微镜复查,导致结果不准确,引发了不少医疗投诉、纠纷。例如某女性发热患者到某市级医院看病,血细胞分析结果为白细胞21.5×10 /L,血红蛋白98 g/L,血细胞直方图异常,但检验科没有对其进行人工显微镜复查就发报告,临床医生根据患者发热、月经过多等症状,诊断为上感及月经不调,治疗三个月后,未见明显效果,到上一级医院检查,白细胞已升至30.2×10 /L,血红蛋白下降为89 g/L,血细胞直方图异常,经人工显微镜复查发现外周血有35%的幼稚细胞,骨髓穿刺细胞学诊断为白血病。由此可见,过于依赖仪器分析结果,一方面降低了检验师们对专业知识的要求,认识细胞形态学的能力下降了,另一方面担误患者的诊断治疗。检验界已意识到这个问题的不良后果,《中华检验医学杂志》编辑部已专门组织专家召开了“加强形态学临床检验专家座谈会”,并提出了解决问题的方案。因此,在日常工作中,应加强血细胞分析仪细胞异常结果的人工显微镜复查,确保每一份血常规检验报告的质量,特别是避免恶性血液疾病的漏检。
3,血细胞分析结果的可比性
目前,国内大中型医院普遍存在多台相同或不同生产厂家的血细胞分析仪,而型号及试剂不同的检测系统对同一标本相同项目的检测结果间的差异,有时会远远大于可接受的误差范围。张文等对7个不同的血细胞分析仪测定白细胞结果进行比对,发现其检测的白细胞精密度符合临床要求,但临床可接受性能评价存在不可比性,需要采取整改措施 。
整改措施主要涉及血细胞分析仪质量控制及校正问题,卫生部临床检验中心已开始建立和逐渐完善我国血细胞分析溯源体系,并且准备在全国范围内推广应用,这将对血细胞分析的质量控制与校准体系的建立发挥重要作用。但是,血细胞
分析的质量控制与校准体系的建立还面临许多困难,如血细胞分析的质控做准品有效期短、价格贵、难以按期得到等因素导致其难以常规开展 。血细胞分析的校准品主要有商业校正品和定值新鲜全血,商业校正品对其配套的血细胞分析仪校准结果理想,而对非配套仪器的校准结果较差。使用新鲜全血对血细胞分析仪检测结果的比对和校准,多数进行的是其可行性研究。研究证明新鲜全血适用于不同型号血细胞分析仪校准,特别是不易获得配套校准品的仪器,成本较低,适用性强。
4,结语
为了提高血液分析仪检测结果的准确性,实行全面质量控制及校正至关重要。血标本的正确采集、抗凝剂的合理使用是分析前的关键,对异常的细胞计算结果、直方图异常者应该加强人工显微镜复查,完善血细胞分析溯源体系,探讨符合909 我国实际的标准化方案确保分析结果的一致性,建立一些参考检测系统或实验室。而选择合格的新鲜全血对血细胞分析仪进行比对是一种成本较低、适用性强的提高不同血细胞分析仪检测结果可比性的方法。
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