蔗糖酶(-D-呋喃型果糖苷**酶EC3.2.1.26):

1. 配12支蔗糖底物浓度分别为0、0.005、0.00625、0.0075、0.00875、0.010、0.0125、0.015、0.02、0.025、0.0375、0.050M(在35度水浴保温);

2. 加入3单位/毫升的酶溶液(已在35度水浴保温),准确作用5分钟,终止反应;

3. 各吸取0.5毫升反应液与3,5-二硝基水杨酸,沸水浴5分钟,冷却后在540nm测定吸光度OD值;

4. 作图。

酶浓度对酶反应的影响:当底物浓度足够大时,所有的酶都被底物结合,酶促反应速度达到最大。

V=Vmax = K3[E]

蔗糖转化反应速率常数的测定(蔗糖酶米氏常数)(1)

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