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枯草芽孢杆菌扩大培养的详细步骤(微信课堂芽孢杆菌的简易扩培技术及应用原理)(1)

芽孢制剂我们已经用了很久了,通常我们大家都知道枯草芽孢杆菌,今天讲的还包括地衣和短小。

芽孢是一种无荚膜,周身鞭毛,能够运动的革兰氏阳性菌。它的个体相对来说比较小,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。在液体培养基中生长时,常形成皱。可广泛分布在土壤及腐败的有机物中,很容易在枯草浸汁红大量繁殖,因此而得名。

枯草芽孢杆菌是一种兼性耗氧菌,一个是喜好,一个是消耗,它喜好有氧气也消耗大量的氧气。在无氧的环境中基本不能萌发,但是它的营养体可以部分存活,只不过它的净水功能会减退。这一点大家要注意,并不是在缺氧的环境下它就不能存活,虽然在无氧的条件下,休眠体虽然不能萌发,但是营养体依然能够存活下来。

根据2008年1126号公告这里面批准使用的安全微生物只有两种芽孢,一种是枯草芽孢,一种是地衣芽孢,今天我们还加上了一个短小。根据在实践当中得到的结论是枯草配地衣、配短小芽孢杆菌,按照一定的比例之后,比单用枯草、地衣、短小的效果好。

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菌种的来源

菌种的来源我就不介绍了,因为前面已经讲过了。

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拌料内服的主要作用:

1、芽孢本身在消化道中是存在的,菌体自身合成酶类,在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用;促进饲料中营养素的降解,也就是降低饲料系数,所以很多饲料生产企业在生产饲料的过程当中会添加芽孢制剂,不用担心它的耐受性,因为颗粒饲料的生产过程当中温度会达到121度,虽然很短暂,但是它会达到这样一个温度,膨化饲料的生产过程中达到的温度更高。但是大家记住了,芽孢会被杀死,因为芽孢杆菌特别能耐高温,121度要10-30分钟才能杀死一部分芽孢;

2、能合成多种B族维生素,提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性来刺激动物免疫器官的生长发育,激活T、B淋巴细胞,提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高水产养殖对象的群体免疫力,这个是很关键的,当然这个是我们肉眼看不到的,所有我们的饲料中添加芽孢的好处,养殖户是看不到的。

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3、芽孢菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用;在肠道中降低肠炎的发生率,和乳酸菌有类似的功能,乳酸菌和芽孢杆菌在肠道内起到互相促进的作用。

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4、迅速消耗环境中的游离氧(在体内),造成肠道低氧,促进有益厌氧菌生长,并产生乳酸菌等有机酸类,降低肠道pH值,间接抑制其它治病菌生长。

从这个意义上来讲,在饲料中添加芽孢杆菌,可以有效的降低饲料系数,能够一定程度上降低细菌性疾病的发病率。

用于水体环境的主要作用

其实它就是一个净水的功能,能够分解各种有机质,综合净化水环境,改善过肥的水质。芽孢杆菌的营养体是耗养菌,它到底有多耗养,有我们想象中的那么耗养吗?有那么可怕吗?其结果是否定的。其实芽孢杆菌虽然耗养,但是没有我们传闻当中厉害,消耗那么多得氧气。我要正面宣传一下,它的耗养和减少耗养物质是有关联的。

在很多情况下,我们的老百姓包括一部分从业人员,只看到了芽孢杆菌是耗养菌,但没有看到芽孢杆菌这类物质分解大量的原本也需要消耗氧气的有机质。实际上,分解有机质的过程,虽然芽孢杆菌在消耗氧气,但是如果它不分解这些有机质,有机物沉到水底或者悬浮在水体中难道它们就不耗养吗?因此,芽孢杆菌虽然耗养,但它也消耗了原本也要消耗氧气的有机质。所以它并没有我们想象中的那么可怕。

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芽孢杆菌的应用范围

目前芽孢制剂的应用主要在

  • 1、污水处理、工业循环水处理,腐化槽、化粪池等处理,畜牧养殖动物废料、臭味处理,粪便处理系统,垃圾、粪坑、粪池等处理;

  • 2.畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖,水产养殖也在用;

  • 3.还可以与多种菌种混配,在种植业、土壤当中也起到了非常重要的作用。

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相关的问题

1.枯草芽孢杆菌的菌体和芽胞的关系;

所谓的菌体指的是营养体,就是已经萌发出来的。形成的芽孢实际上是休眠体,芽孢的表面有一层厚厚的荚膜,它能耐高温、耐腐蚀、耐化学制剂的清洗。用消毒剂去杀芽孢要很长的时间才能杀死它,用消毒剂去杀病毒或者细菌相对来说更容易得些,而杀死产生芽孢的这种菌相对来说就难多了,要用更长的时间和较高的浓度。

那么到底休眠体的芽孢和营养体的芽孢杆菌有什么区别,他们之间的关系又是什么呢?

大家都知道西游记,西游记的第一章第一回,孙悟空是从一块石头里面蹦出来的,这块石头我们可以理解为这个芽孢杆菌形成的休眠体,就是芽孢。他蹦出来之后就是活的了,就是营养体的芽孢杆菌,这就是他们之间的关系。孙悟空在石头里面的时候用子弹打他、刀去砍他都没事,不会受影响,孙悟空一旦蹦出来以后枪还是可以打死的。

换句话说休眠体的芽孢萌发成为营养体的活菌的时候,它更容易死亡掉。因为休眠体的芽孢(就是现在卖的芽孢粉剂)变成营养体后就是活的,活的就会受到环境因素的影响,以及其它所有的不利因素对它的的影响,比如讲缺乏营养、温度过高、温度过低和紫外线的侵袭,都可能造成不可逆的损伤,导致它的死亡。

2.与地衣、短小芽孢杆菌合用的比例;

这是一个商业机密的问题,可能在这里我不能跟大家说的清楚。因为很多企业都在研究这个问题,到底怎么样去用,什么样的比例才能够发挥更好的功效,这是一个商业机密。

3.与沼泽红假单胞菌搭配使用改良水质效果明显;

如何和其它的有益菌搭配这是一个很科学的问题,一般来讲,在天晴的时候,早上日出后尽早的使用沼泽红假单胞菌,比如讲6点天气亮了就可以用了,到了中午12-1点之间再使用一次芽孢杆菌,这样对于水质的改良有明显的效果。

4. 存放要求;

一定是干燥、通风、阴凉处。一定把干燥放在第一位,大家注意潮湿的环境芽孢容易萌发。

5.水体中正确的使用时间溶氧条件;

这个很重要,和耗养是有关系的。水体中正确的使用时间通常是在中午这个时段。

溶氧的条件我告诉大家,无论是一天24小时的任何一个时间段,我们测量底层水(指的是养殖池塘,湖泊或者更深的水库就没法做了),只把水测到3米深,底层水溶氧,比如早上8点钟的时候去测底层水溶氧达到或者超过4mg/L。在这样的一个条件下,无论今天是不是下雨,还是天晴,我认为都可以大胆的使用芽孢。

6.夏季大风大雨过后,天气转晴时使用是良机。

为什么,在这个时候使用效果是最好的,因为大风大浪过后,水体可能发生了垂直交换,底下的有机质可能都会搅起来了,悬浮在水体当中比较多,这时候我们使用芽孢更能够发挥芽孢的作用,实际上我要给大家说一个很好的办法,就是在什么时候使用芽孢有说服力。

一般来讲,我在使用芽孢的时候一定有一个前提条件。第一就是溶氧要达到,第二、我一定会在养殖户的池塘边,在任意一个点,用一个白色的塑料桶,打半桶水上来,静置15-30分钟,有的15分钟就够了,放上15分钟之后,你就会发现桶底会不会有沉淀。桶底明显有沉淀,我就要用芽孢了,如果静置30分钟一点都没有得话,我可能就选择不会用芽孢,为什么呢?有沉淀物说明这个水体中悬浮的有机质特别多。

这个情况使用芽孢制剂,今天中午12点用了,明天再去看,同样的地点用白色塑料桶打半桶水,方式15-30分钟,桶底没有沉淀了,说明这些沉淀物质可能就被我们的芽孢杆菌消耗掉了。这就是证明用芽孢有没有效的简单的方法。每个人都可以判断的。

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关于芽孢的使用

我们以2000亿枯草芽孢杆菌原粉为水体用量标准

正常的水质调控使用量:5克/亩.米

一般的生成企业我们把枯草芽孢杆菌的原粉提供给他之后,建议使用100-300目的沸石粉为载体稀释成200亿级或100亿级的成品再使用于水体,这是一个通行的方法。

可用于粪肥等有机质的有氧发酵!也是可以的,但是养殖户一般不具备生产扩培条件。

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芽孢的活化

活化的目的其实是激活休眠体让它变成营养体,有可能的情况下获得更多的营养体,迅速提高。一个芽孢变成一个营养体需要的条件:温度适宜,有充足的氧气,有水分、有它的食物——培养基,但是大家想一想我们养殖户的活化芽孢的条件能否达到我们上面说得4个条件。

我们有一线工作经验的同志们可能就知道了,我们养殖户在活化芽孢的时候用红糖水一泡,可是你想过没有你的红糖水在泡的过程中里面的溶氧有多少,会不会都消耗掉了。如果芽孢休眠体在有培养基、有水分、温度也适宜,刚开始有一定氧气下的条件下,它迅速被激活了,你想想它变成营养体了,突然氧气消耗掉了,底层的芽孢活菌可能会死掉,它都来不及变成休眠体就会死掉,因此活化的结果不见得是我们预期的那样。

因此科学的活化芽孢应该是在活化的容器里面一定要增氧和搅拌。搅拌的目的让培养基和菌种充分的混合均匀,增氧的目的就是不断的提供氧气,让更多的芽孢长出来。

当然这个时间也很科学,因为芽孢从休眠体萌发变成营养体是需要很长时间的,不是半个小时、一个小时,根据不同的菌种,萌发的时间长短不一。每个公司拿到的菌种菌株型可能不一样。在这里我不好说一个准确的时间,

我们做出来的芽孢成品,我们建议不用活化,直接使用。和别的公司是不是有区别,我不敢说,因为没有检测。我们的产品不用活化,一定有效。

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枯草芽孢杆菌的扩培

固体发酵:用饼粕、麸皮、米糠等培养基和菌种搅拌均匀。

相对来说堆积的高度越低,产生的热量更容易散发出去。因为我们实测结果是堆积物料过高的地方,温度可能达到70度了,发酵的过程中产生大量的热能,无法有效的散发出去,所以我们在芽孢的固体发酵的过程当中,所以一定要注意定期搅拌、底部通风、散热。

固体发酵的缺点,获得产品菌数不稳定,一般200亿个/克左右。所以一般不建议养殖户去扩培芽孢甚至不建议养殖户用不科学的方法去活化芽孢。

液态发酵:使用发酵罐投入培养基密闭恒温发酵(增氧),获得产品菌数稳定,菌数可以达到万亿级别。

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我还得重复一下之前讲过的一段话。因为它非常重要。在我们使用各种有益的微生物制剂,用到水体当中,希望得到的结果是好的,但是我们投入的芽孢、光和细菌、乳酸菌等活菌真正的能够在水体当中长时间的大量存活和增殖吗?这个答案是否定的,尤其是乳酸菌存活的时间相对来说更短一些,而芽孢和光合细菌存活的时间相对来说长一些,他们有些能够增殖,能够定殖。但是由于环境的改变的,他们的菌种出现了功能上的衰退。

由于菌体在水环境当中和我们之前的给它一个充足的定向培养基,给它一个恒温的条件,没有竞争者的条件,在这里两者不同的环境下,投入到水体中的活菌,都会在相对来说短时间内发生变异,功能上也会发生转变,也就不能够达到我们的预期。因此我们投入一次,可能过一段时间又得重新投一次。实际上,他们本身能够发生一定的功能之外,更大的发挥功能的地方是在它们的代谢产物,它们的代谢产物促进了土著微生物的大量的繁殖。

因此我一直在讲我们投入的活菌制剂实际上起到了一个药引子的作用,大家想一想,我们投入的菌,就那么多,分散到水体当中实际上市很少的,量并不多。但是为什么它们起到了明显的这样那样的作用,药引子的作用,四两拨千斤。

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