佳能100-400mm F4.5-5.6L IS II的镜头直径为94mm，长度为193mm，重1640g，是一支重量与体积都能和便携性挂上钩的超长焦镜头，体积上和重量上都达到了支持手持拍摄的水平，而结构上，由上一代的14组17片升级为16组21片。镜头表面采用了防污氟镀膜，更加容易的清除灰尘、水滴和指纹油污。
实拍样片（多重曝光）
从上一代的推拉式变焦改为了更为常见的旋转式变焦，这是佳能100-400mm镜头最大的变化，上一代的推拉式变焦在结构上较为特殊，使用起来会有误操作的可能，因此新一代的镜头改为更常用的旋转式变焦，操作手感更符合大众的习惯。佳能EF 100-400mm F4.5-5.6 IS II镜头镜筒体积与小白类似。但400mm端时伸出长度较多，镜头整体体积变得更为粗壮。
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佳能EF 100-400mm F4.5-5.6L IS II镜头的镜身上有四个拨杆，其中对焦范围、对焦模式以及防抖开关不需介绍了，几乎所有的长焦镜头都标配这三个拨杆，而防抖模式方面，新款100-400mm镜头提供了三种模式。模式1用于校正所有方向的抖动，日常手持拍摄静态物体可以使用该档；模式2用于对画面水平或垂直方向移动的物体进行防抖校正；模式3只在曝光期间校正震动，用于校正在拍摄不规则运动时的晃动。而且防抖级别能够达到4级，比上一代的两级防抖效果要好很多，这在实际拍摄时可以感受到。
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佳能EF 100-400mm f/4.5-5.6L IS II USM镜头是长焦变焦镜头，因此广角端的焦距也达到了100mm，佳能EF 100-400mm f/4.5-5.6L IS II USM作为经典镜头的升级版本，在锐度表现上也有很大的进步，100mm端的成像效果来看，最高锐度表现在F8光圈下实现，最大光圈下的锐度表现仍旧不错，光圈小于F16后锐度下降较明显。整体锐度不算很高，但比起上一代的产品来说，也有不小的进步，新镀膜也让色散等情况降到最低。
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佳能EF 100-400mm f/4.5-5.6L IS II USM镜头是一支长焦镜头，因此即使在100mm端，也已经有很好的背景虚化效果，最大光圈F4.5，并不是大光圈的长焦镜头，但是即便如此，佳能EF 100-400mm f/4.5-5.6L IS II USM镜头仍然能在全光圈范围内都有较为浅的景深。
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