无菌间是微生物实验的重要环节，关系到实验结果的准确性，无菌间的使用规范要严格要求，保证实验环境影响因素降到最低。
使用要求：
1、无菌间在使用前，必须先进行清理、臭氧杀菌时间50min或紫外灯杀菌30min。
2、检测使用的器皿、样品等物品的进出，通过缓冲窗进行传递，使用完毕后紫外灯杀菌30min，开传递窗时禁止两边同时打开。
3、检测人员进入缓冲间后，先更换拖鞋、佩带无菌帽和一次性口罩，更换衣服，并将其摆放整齐，方可进入无菌间。
4、进入无菌室过程中，依次打开和关闭各缓冲间的门，以避免空气流通带入外界的杂菌。
5、无菌操作前必须使用75%酒精对手部进行消毒，接种有害菌种时必须戴手套。
6、进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经严格消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼后使用，剪刀、镊子至少每周进行一次高压灭菌。
7、从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。
8、接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
9、接种环或针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。
10、吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
11、检验结束后，所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快清理出无菌间灭菌洗刷。
12、检验结束后，人员离开无菌间前，须将无菌间的卫生彻底清理、并用紫外灯进行杀菌。
13、无菌间所用工器具（剪刀、镊子、胶头、涂抹棒、托盘盒等）使用完毕后，摆放整齐。
14、灭菌后的无菌间悬挂“已灭菌”标识，正在使用的无菌间要悬挂“使用中”标识。防止检测人员在未经过灭菌的无菌间中进行微生物检测。
其它注意事项：
1. 禁止在无菌间内打手机，由于业务需要可在缓冲间内打手机。
2. 实验过程中穿着整齐，不要出现露头发、鼻孔等现象，禁止在无菌间打闹、喧哗。
3. 实验过程中，物品要摆放整齐，实验产生的垃圾要单独存放不要乱放，防止污染实验样品。
4. 紫外灯每周五打扫卫生时要用酒精棉球擦拭，防止灰尘阻挡影响杀菌效果。
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