美国那边也出了问题，雷率领殖民者去寻找良港以便迁移，他们和原住民起了冲突，幸亏遇到德雷克船长的劫掠船队，英格兰人才击溃数量庞大的原住民敌人。雷利是一个好战士，好领导，却不是一个好的殖民领袖，因为他完全对农业没概念，他的属下也是如此。他们有的出身良好家庭，有的出身下层社会，可是全部是城里人，会打仗会探险，但是却都不会种地。就在雷利决定放弃这个事业，乘着粮食没有耗尽返回英格兰的时候，1587年5月，三艘船组成的救援船队到达了美国。这只救援船队带来了一百五十名殖民者，他们中间还有一些妇女和儿童。 目的不明带来的矛盾冲突又出现了，救援舰队的提督是西门-费南德兹，他执意要率领舰队去追击西班牙财宝船，新任总督约翰-怀特和他起了争执，但是怀特并没有被赋予指挥费南德兹的权柄。最后怀特只好跟着费南德兹离开美国，他希望能够说服雷利，迅速派遣一支新的救援部队，以保卫殖民地为任务，而不是忙着劫掠西班牙财宝船。就这样，舰队留下114名殖民者离开了美国。
1587年11月，怀特回到南安普顿，他发现全国上下都在紧张地预备战争，英格兰正忙着预备抵抗西班牙的入侵征服。
1588年3月，雷利和格林威尔终于预备好八艘船组成的罗尔诺克救援队，他们却接到枢密院下达的命令，命令两人离开加入德雷克船长麾下，出战西班牙无敌舰队。怀特缺乏航海指挥经验，而且他此刻也找不到大船进行跨大西洋航行，所有大船都被征集参战了。
西班牙无敌舰队覆灭之后，英格兰士气大涨，英格兰策划组织英格兰无敌舰队，准备正面挑战西班牙海军。
1589年，德雷克提督率领抗罗宗世界海军挑战罗马公教守护者西班牙王家海军，英格兰无敌舰队包括6艘西班牙大帆船，60艘武装商船，60艘荷兰飞船和20艘荷兰快艇。这场大规模的海战以抗罗宗羞辱性质的惨败而结束，英荷联军丧失了四十多艘战舰和一万多名官兵，西班牙方面则只损失了4艘西班牙大帆船和900多官兵，老海狗和海上乞丐还是无力正面挑战西班牙海军。
1590年8月，怀特终于带着救援船队回到殖民地，90个男人，17个妇女和11个儿童全部消失了。救援队四处寻找殖民者的下落，只在一棵树上刻着大写的CRO三个字，在另一棵树上则刻着克罗托安Croatoan。根据事先的约定，如果殖民者要被迫撤离殖民点，他们会留下他们他目的地。如果是遭到攻击而被迫撤离，他们会在目的地标志旁立下一个马耳他十字架，救援队并没有找到十字架。这个殖民地被称作失落的殖民地，成为美国历史的一个疑案。
到今天为止，学者们还在寻找那批失落的殖民者的下落，并且提出了各种假说。有一种假说认为，原住民袭击了殖民点，这些原住民杀光男人之后，剩下的女人已经和原住民融合在一起了。基于这个假说，学术界出现一个DNA追踪项目，结合考古挖掘和DNA追踪的手段，找寻这个失落殖民地的下落，但是到目前为止，依旧没有取得令人信服的进展。
雷利在这次殖民定居冒险项目失败之后转移了兴趣，他从西班牙人那里听到一个传说，在南美洲卡尼罗河的深处隐藏着一个黄金国，他从此和许多西班牙探险家一样，执着地寻找这个传说中“埃尔-德罗达”El Dorado。
詹姆斯国王继任之后，雷利遭到叛国罪和异端罪的指控，后世的庭审记录告诉我们，雷利对叛国罪供认不讳，他不仅不承认詹姆斯是合法的国王，他甚至向西班牙建议了最佳的入侵登陆地点。詹姆斯国王并没有处死他，而是把他囚禁在伦敦塔内。1617年，他向国王请求给予他探险发现的机会，他要再去南美寻找“埃尔-德罗达”，但是他居然在探险过程中袭击劫掠西班牙殖民点。
雷利在民间享有很高的声望，他在普利茅斯登陆被捕之后有许多逃跑的机会，但是他却选择走上断头台。1618年10月，他在西敏寺王宫外广场接受斩首死刑。詹姆斯国王一直没有公布雷利的叛国罪证和庭审记录，因此当时许多人为他的死刑而愤愤不平，认为这是一场冤案。
雷利失败的殖民冒险为后人积累了宝贵的经验，英格兰学者对这次失败进行了许多讨论和研究。
哈克卢伊特在他的殖民事业指导手册里认为，建立贸易据点和发展商业是殖民地发展繁荣的观点，他同时认为宗教应该是一个重要的因素，殖民地除了种植商业作物之外，还必需种植粮食作物以维持生存。但是他并没有提到应该以家庭移民的方式殖民美国，他认为应该把破产者和罪犯送去美国，给他们一个改过自新的机会，他们可以成为农业生产的劳动力。
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