为什么检测细胞状态?

细胞状态是直接反应细胞生理状态的重要指标,我们可以通过确定测试分子是否对细胞增殖有影响或具有直接的细胞毒性效应来进行化合物筛选。所以评估细胞状态是日常细胞操作中的一个关键步骤,也是后续处理的一个要求。

常见的细胞检测有哪些?

▪ 细胞计数

▪ 细胞活力

▪ 细胞增殖

▪ 细胞凋亡

▪ 细胞死亡

酶标仪检测荧光值(利用Feyond-A300多功能酶标仪进行细胞活力的检测)(1)

常见的检测细胞状态的仪器有哪些?

▪ 细胞计数仪

▪ 流式细胞仪

▪ 成像(显微镜、高内涵等)

▪ 分光光度计

▪ 酶标仪

用于细胞活力检测的多功能酶标仪

吸收光(MTT)

MTT(四氮唑蓝)是一种适合于高通量筛选96孔的细胞活力测定法。它是利用活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶对MTT进行还原,形成不溶于水的紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞质中,最后使用特定的有机溶剂,如二甲基亚砜(DMSO)等溶解后,在570nm处进行吸收光的检测,检测的吸光度值越高,说明细胞中线粒体的代谢活力越强。

酶标仪检测荧光值(利用Feyond-A300多功能酶标仪进行细胞活力的检测)(2)

荧光(刃天青Resazurin)

活细胞会在细胞质中维持还原环境,刃天青(Resazurin)染料是一种氧化还原指示剂,当它被活细胞还原为试鲁灵(Resorufin)后,可被579nm的激发光激发,而产生584nm的发射荧光,荧光信号的强度与活细胞的数量呈正比,从而来判断细胞的活力。

酶标仪检测荧光值(利用Feyond-A300多功能酶标仪进行细胞活力的检测)(3)

化学发光(Luciferase)

活细胞中可以产生大量的ATP,因此可以通过对ATP进行定量测定来检测培养物中活细胞的数目,细胞裂解和产生的发光信号与存在的ATP量成正比,而ATP量直接与培养物中的活细胞数量成正比。

酶标仪检测荧光值(利用Feyond-A300多功能酶标仪进行细胞活力的检测)(4)

细胞实验室的小帮手

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酶标仪检测荧光值(利用Feyond-A300多功能酶标仪进行细胞活力的检测)(5)

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