1.1选择其他组织或器官做为外植体 | 1.1.1白掌肉质花序的诱导和植株再生 | ①不同的6-BA与NAA的浓度及比例对白掌肉质花序诱导的效果。 | 测试品种272,使用①号配方。 | 测试品种272,使用①②③三个配方,切法由横剖改为纵剖 | ||||||
测试品种278,使用①②③三种配方, | ||||||||||
②其他生长调节剂对白掌花序诱导和植株再生的作用(2,4-D 、KT) | ||||||||||
1.1.2叶片、叶柄等其它组织的诱导与植株再生 | ||||||||||
1.2母本预处理 | 1.2.1启动前一周农用链霉素灌根 | ①1 g/L、0.5 g/L、0.25 g/L浓度的农用链霉素灌根,测试品种294 | ||||||||
1.2.2启动前一周进行黑暗培养 | 测试品种294 | |||||||||
控制启动的污染率在15%以内,生产继代后材料的污染率低于1.5% | 1.3外植体处理 | 1.3.1自来水冲洗外植体 | 母本控水,控水程度为盆栽表土发干,最好是植株叶片出现轻微失水萎蔫为宜 | |||||||
1.3.2根茎挖孔再消毒 | ①测试品种277、278 | |||||||||
1.3.3根茎上的芽逐个切下再消毒 | ①一个外植体切成1个顶芽,3~5个腋芽,即切除多余的根茎段组织,消毒后一个培养瓶接种一个芽(腋芽使用15ml体积的白螺口瓶作为0代的培养瓶) | |||||||||
1.4污染材料的挽救 | 1.4.1已污染材料的再消毒 | ①酒精 升汞组合消毒 | ||||||||
1.4.2污染母瓶里未表现出污染现象的材料的挽救 | ①直接挑取细菌污染母瓶未表现出污染现象的材料进行转瓶 | |||||||||
②挑取细菌污染母瓶中未表现出污染现象的材料,重新消毒后再进行转瓶 | ||||||||||
1.5在培养基中添加抑菌剂 |