1、托比·马奎尔饰演蜘蛛侠（彼得-帕克）
17岁的托比就在电影中担当男主角，2002年开始担任《蜘蛛侠》系列男主角，2009年托比在《兄弟》中的演出获得第67届美国金球奖剧情类最佳男主角的提名，2013年托比与多年好友莱昂纳多·迪卡普里奥合作演出了《了不起的盖茨比》后慢慢淡出观众视野。他被认为是最经典的蜘蛛侠，也是最受观众喜爱的。
2、克尔斯滕·邓斯特饰演玛丽-简-沃森
2002年至2007年邓斯特因在《蜘蛛侠》三部曲中扮演玛丽-简-沃森一角而走红，2011年凭借科幻片《忧郁症》获得第64届坎城电影节最佳女演员奖。
4、威廉·达福饰演绿魔
对于两届奥斯卡提名的威廉·达福来说，在电影《蜘蛛侠》中的演技无可挑剔，外表虽有些凶狠，但实际上为人却很谦卑。好莱坞中很少有人能像达福自在的游走在危险边缘，他穿梭在主流与非主流之间，既能胜任大制作中的小角色，更能演小制作里的大角色。
5、阿尔弗雷德·莫里纳饰演章鱼博士
阿尔弗雷德出演《蜘蛛侠2》中的章鱼博士，精准的掌握了这位反派角色的两面性格，将角色的心理特征表现的淋漓尽致，但是在蜘蛛侠之后的阿尔弗雷德就没有演出让人印象深刻的角色。
6、托马斯·哈登·丘奇饰演沙人
同时作为编剧、导演、演员的托马斯十分的多才多艺，2004年在喜剧电影《寻找新方向》中扮演一名失败的演员，让他获得了奥斯卡最佳男配角奖提名，但是在拍摄完《蜘蛛侠3》之后为了陪伴家人，托马斯便退出了影坛。
7、托弗·戈瑞斯饰演毒液
长相秀气的戈瑞斯在拍摄完《天人交战》后成为人气偶像，《蜘蛛侠3》中的毒液让他获得最佳荧幕反派提名，可惜在之后的演出中，他没有得到任何主要角色而逐渐被人淡忘。
8、布莱丝·达拉斯·霍华德饰演格温·斯黛西
美女演员布莱丝在电影《蜘蛛侠3》中让观众们眼前一亮，还记得《侏罗纪世界》中脱下高跟鞋与暴龙赛跑的美女吗？没错就是她！
9、罗斯玛丽·哈里斯饰演梅姨
90岁高龄的罗斯玛丽绝对是一个老戏骨，1994年凭借电影《汤姆和维芙》获得奥斯卡最佳女配角奖提名。在《蜘蛛侠》系列中饰演彼得-帕克的婶婶而被观众所熟悉，如今90岁高龄的她身体仍然非常健康。
10、伊丽莎白·班克斯饰演贝蒂-布兰特
彼得-帕克所工作的“号角日报”中那位美女秘书让人印象深刻，如果看过重口味电影《撕裂人》的话，你应该会记得里面的美女主角。2015年伊丽莎白·班克斯凭借在《饥饿游戏：自由幻梦》中的表演获得最佳荧幕大变身，同时她还执导了票房可观的电影《歌喉赞》第2和第3集，是一位不可多得的才女。
11、比尔·努恩饰演约瑟夫-罗伯森
彼得-帕克在号角日报工作的同事，1998年曾饰演《海上钢琴师》中水手的养父。在2007年的《蜘蛛侠3》之后比尔就逐渐淡出影坛，2016年9月24日在美国宾夕法尼亚州匹兹堡病逝。
12、布鲁斯·坎贝尔饰演摔跤手、守卫、法国服务员
看过《鬼玩人》的话，就会记得男主角艾许，布鲁斯·坎贝尔在《蜘蛛侠》三部中接连客串了三个角色，每一个角色都为《蜘蛛侠》电影增添了一些笑点。2015年宝刀未老的布鲁斯·坎贝尔再次饰演电视剧《鬼玩人之艾许斗鬼》中的艾许。
13、克里夫·罗伯逊饰演本-帕克
如果你认为他只是一般普通的老爷爷，那可能你就大错特错了，早在1969年，克里夫就凭借电影《查利》获得第41届奥斯卡最佳男主角。2011年9月10日，88岁高龄的克里夫去世。
14、詹姆斯·克伦威尔饰演史黛西上尉
作为好莱坞老牌影星，克伦威尔在《蜘蛛侠3》中饰演了关-史黛西的警员爸爸，但随着年龄的增长，克伦威尔也从幕前转为幕后工作。
15、乔·曼根尼罗饰演闪电汤普森
2002年的《蜘蛛侠》是曼根尼罗在大荧幕上的处女秀，饰演了欺负彼得-帕克的校园恶霸，2007年回归《蜘蛛侠3》。在2012年，曼根尼罗与查宁-塔图姆合作出演《舞棍俱乐部》，2014年与阿诺-施瓦辛格合作出演《震撼杀戮》，随后更是加盟DC，饰演超级反派“丧钟”，随后的《蝙蝠侠》系列和《正义联盟》他都将登上荧幕。
