体外受精联合胚胎移植技术(IVF):又称试管婴儿,是指分别将卵子与精子取出后,置于试管内使其受精,再将胚胎前体---受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。试管婴儿是用人工方法让卵子和精子在体外受精并进行早期胚胎发育,然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
1.控制性超排卵
一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调,再施与HMG或FSH排卵药物,刺激卵巢中的卵泡成长,依据病人对药物的反应性调整药物使用剂量,病人的年龄及药物的使用剂量不同,所获得的卵子数亦不同。由于自然月经周期的长短因人而异,同一病人不同周期也存在差别,所以不易安排取卵时间,而且自然周期中只有一个优势卵泡发育,受精后只能形成一个胚胎,而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的,提供多个胚胎移植,并尽量黄体发育与子宫内膜功能同步。
2.监测卵泡
为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间,须利用阴道B超来监测卵泡大小,并配合抽血检查E2值(雌性激素),调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当,便可注射人绒毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34~36小时取卵。
3.取卵
最常用的取卵方式是在局部麻醉下,经阴道B超引导,将取卵针穿过阴道穹窿,直达卵巢吸取卵子,并立刻在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中,置37°C的培养箱中培养。
4.取精
精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手,用自慰法留取精液。所给的小杯是无菌的,留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。
5.体外受精
取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中,共同培养18小时后,可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差,无法自然受精,则以显微注射法强迫受精 (参考卵胞浆内单精子显微授精)。
6.胚胎移植
受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据病人的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目,多余的胚胎可冷冻保存。胚胎移植一般不需麻醉。
目前多在受精后2-3天移植胚胎,所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间,对体外培养的条件要求就越高,但推迟移植时间更符合妊娠生理,同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
7.胚胎移植后补充激素
目前,我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。假如确定妊娠,则改用hCG继续补充到怀孕10周。
8.妊娠测试
胚胎移植后14天,可由验尿或抽血确定是否妊娠。
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