SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方1. 分离胶(12%)，今天小编就来说说关于试剂中的纯化水电导率标准?下面更多详细答案一起来看看吧!
试剂中的纯化水电导率标准
SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。1. 分离胶(12%)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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分离胶(12％) |
30％丙烯酰胺 |
6.0 ml |
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1.5 mol/l Tris-HCl |
3.8 ml | |
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10%SDS |
150 μl | |
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10%过硫酸铵 |
150 μl | |
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TEMED |
6 μl | |
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蒸馏水 |
4.9 ml |
2. 浓缩胶(5%)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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浓缩胶(5％) |
30％丙烯酰胺 |
1.3 ml |
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1.5 mol/l Tris-HCl |
1.0 ml | |
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10%SDS |
80 μl | |
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10%过硫酸铵 |
80 μl | |
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TEMED |
8 μl | |
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蒸馏水 |
5.5 ml |
3. 分离胶缓冲液(pH8.9)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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分离胶缓冲液 |
Tris |
36.6 g |
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1 mol/l HCl |
48 ml | |
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蒸馏水 |
补足至100 ml | |
4. 浓缩胶缓冲液(pH6.7)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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浓缩胶缓冲液（pH6.7） |
Tris |
5.98 g |
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1 mol/l HCl |
48 ml | |
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蒸馏水 |
补足至100 ml | |
5. 30%丙烯酰胺(pH≤7.0)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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30%丙烯酰胺（pH≤7.0） |
丙烯酰胺 |
29 g |
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甲叉-双丙烯酰胺 |
1 g | |
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蒸馏水 |
补足至100 ml | |
6. 10%过硫酸铵(W/V)：1g过硫酸铵溶于10ml水中，4℃保存数周，尽量现用现配。7. 10%SDS：将10 g SDS溶于80ml重蒸水中并轻缓搅拌(室温低时需水浴加热溶解)，再定容至100ml，室温存放。8. 样品缓冲液
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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样品缓冲液 |
1 M Tris-HCl（pH6.7） |
5 ml |
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SDS |
2.5 g | |
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巯基乙醇 |
1 ml | |
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溴酚兰 |
0.05 g | |
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蔗糖 |
10 g | |
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蒸馏水 |
补足至100ml |
9. 考马斯亮蓝染色液：0.25g考马斯亮蓝R-250用少量甲醇溶解后，用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀释至100ml。10. Tris-甘氨酸电泳缓冲液(pH8.3)
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配制 |
所需试剂 |
所需体积 |
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Tris-甘氨酸 电泳缓冲液（pH8.3） |
Tris碱 |
15.1 g |
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甘氨酸 |
94 g | |
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10％（W/V）SDS |
50 ml | |
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去离子水 |
补足至100 ml |
凝胶配制所需试剂的母液不能放置太久，有条件的实验室可将母液保存在4度冰箱中，放置母液被微生物污染或者出现沉淀。
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