大家有没有在火车站等核酸报告的经历?火车要开了, 报告没有出来, 傻傻等待核酸结果中!抓狂的内心呼喊: 核酸报告怎么还没有出来???

Medix 推出 Volcano3G® 系列产品, 以新冠为例,可以把常规2小时的检测时间可以缩短为半个小时!

聚合酶和解旋酶的区别是什么(兼具逆转录和聚合酶两种活性的酶)(1)

心动了吗? 心动的话, 咱往下看详细内容, 我们言归正传,慢慢写:

对于RNA样本检测,常规传统的一步法检测,需要依赖于单独的逆转录酶先进行反转录、完成cDNA合成后,再启动DNA聚合酶活性、进入循环扩增环节,整个反应过程耗时相对较长,需要双酶协同工作,对于体系优化具有一定挑战。

Medix Biochemica重磅推出双功能重组酶预混试剂——Volcano3G®,具有高达95℃的热稳定性,兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性,实现零步RT-PCR、粗样本直扩检测。

货号

产品名称

规格

#6101

Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix

100/500 reactions

#6500

RevTaq RT-PCR DNA polymerase 50x concentrated glycerol stock

100/500 reactions

兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性

Volcano3G®预混试剂中,采用的工程化重组Taq DNA聚合酶,兼具逆转录酶和DNA聚合酶活性,可同时实现反转录cDNA的合成和DNA扩增,真正实现零步法RT-PCR检测。

聚合酶和解旋酶的区别是什么(兼具逆转录和聚合酶两种活性的酶)(2)

Volcano3G®中使用的兼具逆转录酶活性的双功能 Taq DNA聚合酶,适用于RNA和/或DNA模板的检测(蓝色实线 、黄色实线 ),而普通Taq DNA聚合酶,仅适用于针对DNA模板的扩增检测(黄色虚线),不能进行RNA反转录(蓝色虚线)。

引用文献:Johannes W. P. Kuiper, Timo Baade, et al. Detection of SARS-CoV-2 from raw patient samples by coupled high temperature reverse transcription and amplification. PLoS One. 2020 Nov 2;15(11):e0241740.

零步法RT-PCR检测,缩短反应时间,支持粗样本直扩Volcano3G®基于适配体修饰热启动酶配方,支持在高温条件下即时启动循环,无需单独的样本提取步骤,实现粗样本直接扩增,并且在双功能工程化酶的作用下,极大程度缩短检测时间。

聚合酶和解旋酶的区别是什么(兼具逆转录和聚合酶两种活性的酶)(3)

Volcano3G®快速零步法 RT-PCR,相较于传统一步 RT-PCR,节省了15 5 min单独逆转录和预变性过程,极大程度缩短了检测时间。

聚合酶和解旋酶的区别是什么(兼具逆转录和聚合酶两种活性的酶)(4)

高达95℃真正耐高温的双功能酶

Volcano3G®热稳定性高达95℃。在45~95℃温度范围依然保持高效的RNA逆转录和DNA扩增效率。较高的逆转录温度有助于减少靶基因中形成的RNA二级结构,提高引物特异性,从而提高扩增效率。

聚合酶和解旋酶的区别是什么(兼具逆转录和聚合酶两种活性的酶)(5)

实验组:Volcano3G®、供应商B和供应商C试剂,于45~95℃加热15min后,用于SCV2为样本的RT-qPCR检测,得到Cq(实验组)。对照组:以SCV2为样本,分别使用Volcano3G®、供应商B和供应商C试剂进行扩增检测,得到Cq(对照组)。

根据Cq(对照组)- Cq(实验组)得到的ΔCq值,可以看出供应商B和供应商C(绿色、橙色)经过高温处理后,增加的ΔCq表明在恒定模板量前提下发生延迟或没有扩增,而Volcano3G®(黑色)经过高温后依然保持高效酶活性,具有更优的热稳定性。

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