培养基:我的“脸色”就是尺

压力蒸汽灭菌普通生物指示物变色原理是什么呢?

是否和化学指示卡一样,通过特殊颜料在满足一定条件后的变色?

看我的脸色

首先让我们回忆一下菌管的套娃结构:

培养箱的使用方法及日常维护要点(小菌管大讲究系列4)(1)

菌管结构

塑料外壳里面包裹着菌片和小玻璃安瓿,小玻璃安瓿里面密封着紫色或者蓝绿色的蛋白胨培养液。

灭菌过程结束后将小玻璃安瓿压碎,等培养液流出与菌片混合,然后在培养器中培养48小时后,根据培养液颜色的变化最后通过阳性对照判读灭菌的结果。

培养液的颜色,并不是蛋白胨本身的颜色,而是培养液里添加的酸碱指示剂的颜色,用于指示随后的阴性生长和阳性生长。

如果灭菌处理不完全,菌片上残活的芽孢遇到培养液就会被激活开始繁殖,代谢成酸,此时pH值开始降低,酸碱指示剂就相应变色,提示我们可能“灭菌不合格”。

所以,通用型生物指示物的变色原理,其实是菌株新陈代谢导致培养液PH值改变造成的酸碱指示剂变色。

我也有“偏好”

为了保证后期判读的准确性,对于培养液中添加的酸碱指示剂的选择也十分严格:不仅要求没有毒性,不能影响着微生物正常的生长繁殖,还要求对酸碱变化有较高的敏感度,毕竟代谢产生的都是弱酸。

通常,嗜热脂肪地芽孢杆菌的酸碱指示剂选择溴甲酚紫(在偏碱性时显紫色,偏酸下变黄色),枯草芽孢杆菌则对应和溴麝香草酚蓝(在偏碱性时显蓝绿色,随着酸度增加逐渐变黄)。

这也是为什么虽然通用型生物指示物种类繁多,菌管中的培养液却大多都是紫色和蓝绿色两种颜色的原因。

(快速生物指示物判读原理与通用型不同,我们下期细说~)

Tips:

1、应在对该产品和过程已确定和确认的规定时间间隔内,对生物指示物进行培养。

2、应遵循生物指示物制造商推荐的培养条件(时长/温度)

3、因生物指示菌管结构的特殊性,在操作时存在危险,注意做好自身防护。

参考文献:

1. GB/T 19972-2005 医疗保健产品灭菌 生物指示物选择、使用及检验结果判断.

2. 生物指示剂爆裂刺伤拇指 1 例警示 当代护士 2016 年 11 月

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